[发明专利]DYS14多态性检测引物及试剂盒

说明书

本发明公开了一种DYS14多态性检测引物及试剂盒，属于体外核酸检测领域，所述DYS14多态性检测引物包括：一对DYS基因引物，一对SRY基因引物和一对GAPDH内参基因引物，所述DYS14多态性检测试剂盒包括上述DYS14多态性检测引物。本发明提供的DYS14多态性检测引物检测限度为20copies/ml，游离DNA小于170bp，更适用于检测游离DNA；同时检测DYS14和SRY 2个基因，检测结果准确性更高；本发明提供的包含DYS14多态性检测引物试剂盒不受样本例数的限制，可分配检测样本例数、样本例数少时无需攒样、出具实验结果快速便捷。

技术领域

本发明属于体外核酸检测领域，具体涉及一种DYS14多态性检测引物及试剂盒。

背景技术

妊娠期间胎儿血循环和母体血循环是相互独立的，它们之间通过胎盘进行物质交换，交换部位主要在血管和体膜，血管和体膜由和体滋养细胞、和体滋养细胞基底膜、绒毛间质、毛细血管基底膜和毛细血管内皮细胞5层组成的薄膜。然而这种屏障具有不完整性。研究证实在母体和胎儿之间存在胎盘面的胎儿向母体输血，少量胎儿细胞通过胎盘进入母体血液循环，所以孕妇外周血中存在胎儿细胞及胎儿游离DNA。近年来，从孕妇外周血中直接提取胎儿游离DNA进行产前诊断日益受到重视，并且发现随着妊娠月份的增长，孕妇外周血中的胎儿游离DNA的含量明显升高。这种孕妇外周血中胎儿游离DNA检测对于发展非侵入性的产前诊断具有很重要的临床意义，尤其与预后和治疗指导方面相联系。

母血中胎儿基因检测在产前基因诊断中有着明显的优势，采用孕妇血液作为检测材料，对胎儿没有创伤性，可在孕早期做出诊断，克服了传统产前诊断技术在取材以及检测时间等方面的缺陷和限制，并可为一些遗传性疾病的产前治疗提供依据。可对性别分化异常、性连锁遗传病及部分异常妊娠的诊断提供依据，开创一种新的无创性产前基因诊断的方法。

体外受精和胚胎移植(IVF-ET)俗称试管婴儿。是一种特殊的临床辅助生殖技术，卵子和精子在体外完成受精，然后把早期胚胎移植到女性的子宫中，在子宫中孕育，在胚胎发育成桑椹胚后，桑椹胚进一步分裂，同时宫腔中的分泌液通过透明带渗入细胞而逐渐形成一囊腔，成为囊胚腔。包围在囊胚腔外的为扁平细胞层，该层细胞个体较小的，将演变为胎盘的一部分，称为滋养层细胞。由于滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，所以做基因诊断时，通常可取少量滋养层细胞检测，这样不会影响正常胎盘的形成，更不会影响胎儿发育。

DYS14基因是Y染色体短臂上特异的单拷贝序列，它与常染色体无交叉序列，不易出现假阳性。通过对Y染色体上的特异序列DYS14基因进行检测，判定胎儿性别，从而对某些遗传病作出产前诊断，采取措施预防遗传病患儿的出生。

用于母血中胎儿游离DNA检测的方法很多，由于胎儿游离DNA的含量极少，常规扩增效果较差，利用实时荧光定量技术有助于提高检测的敏感性。凭借其具有的实时监测、快速、灵敏和精确等优点，已经逐步取代常规技术。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种从孕妇血浆样本和囊胚滋养层细胞中进行DYS14多态性检测的引物及试剂盒。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：DYS14多态性检测引物，包括：

一对DYS基因引物，其序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；

一对SRY基因引物，其序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示；

一对GAPDH内参基因引物，其序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。

本发明还提供一种DYS14多态性检测试剂盒，包括上述DYS14多态性检测引物。