[发明专利]一种低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法

权利要求书

1.一种低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体选择及消毒：于8～10月切取二年生白掌植株，取带4～5片叶柄的茎段，将茎段冲洗、晾干，进行清洁、消毒处理，用灭菌去离子水冲洗干净，吸干水分，剥取带有1～2个叶原基、直径为1～2mm的茎尖作为外植体；

(2)茎尖培养：将茎尖置于1/2MS+0.2～0.6mg/L KT+0.1～0.5mg/L IBA+30g/L蔗糖+7.2g/L卡拉粉，pH 5.8～6.0的培养基中培养，形成无菌单芽；

(3)丛生芽诱导：将无菌单芽转接到1/2MS+0.6mg/L 6～BA+0.02mg/L NAA+30g/L蔗糖+7.2g/L卡拉粉，pH 5.8～6.0的培养基中培养，获得丛生芽；

(4)丛生芽增殖：将丛生芽以双芽形式接种于3/4MS+0.6～1mg/L 6-BA+0.05～0.1mg/LIBA+30g/L蔗糖+6.5g/L卡拉粉，pH 5.8～6.0的培养基中进行增殖培养；

(5)生根及移栽：从增殖获得的丛生芽中切下带根单株，将带根单株置于1/2MS+0.5～1mg/L IBA+30g/L蔗糖+7.2g/L卡拉粉+0.2g/L活性炭，pH 5.8～6.0的培养基中进行生根培养，经炼苗后，移栽于填满泥炭基质的穴盘中进行栽培。

2.根据权利要求1所述的低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(2)茎尖培养条件为：先在6μmol·m^-2·s^-1弱光下培养1周，再转入光照强度为25～30μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h/d，温度为24±2℃，空气相对湿度为60％的条件下培养33天。

3.根据权利要求1所述的低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(3)的丛生芽诱导培养条件为：在光照强度为25～30μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h/d，温度为24±2℃，空气相对湿度为60％的条件下培养80天。

4.根据权利要求1所述的低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(4)的丛生芽增殖培养条件为：在光照强度为25～30μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h/d，温度为24±2℃，空气相对湿度为60％的条件下培养40天。

5.根据权利要求1所述的低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(5)的生根培养条件为：在光照强度为25～30μmol·m^-2·s^-1，光照时间为10h/d，温度为24±2℃，空气相对湿度为60％的条件下培养30天。

6.根据权利要求1所述的低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(5)的炼苗是在温度为24～28℃的温室中炼苗1周。

7.根据权利要求1所述的低激素水平的白掌茎尖组培快繁的方法，其特征在于，所述步骤(5)的栽培是在温度为24～28℃，空气相对湿度为80％的温室中栽培。