[发明专利]标记的维生素D2内标化合物的制备方法

说明书

本发明涉及一种标记的维生素D2内标化合物的制备方法，其包括如下步骤：先将下式（Ⅳ）γ‑酰胺磷盐化合物与下式（Ⅲ）醛，‑40～0℃反应得下式（Ⅴ）中间体；再随后加入Boc酸酐和催化剂反应，再滴加同位素标记甲基格式试剂得下式（Ⅵ）中间体；然后加入四丁基氟化铵反应得成品标记的维生素D2内标化合物。本发明具有的优点为制备的标记的维生素D2内标化合物可用于25‑羟基维生素D2和1，25‑二羟基维生素D2及其串联质谱法检测人血清中VD含量。

技术领域

本发明涉及医药中间体的制备方法，特别涉及一种标记的维生素D2内标化合物，属于有机合成领域。

背景技术

维生素D（Vitamin D，VD) 是一类脂溶性类固醇激素前体，基本化学结构是胆固醇，具有抗佝偻病作用，又称抗佝偻病维生素，它是维持生命所必须的营养素。维生素D家族成员中最重要的成员是VD2（麦角钙化醇）和VD3（胆钙化醇)。不同来源的D2和D3都需要经过血液循环转运至肝脏，在肝酶的作用下首先转化为25-羟基维生素D(25-(OH)VD)，这是体内VD的主要储存形式。25-(OH)VD再转运到肾脏，经过第二次羟基化形成1， 25-二羟基维生素D (1，25-(OH)2VD)，这是活性最强的VD。

下式（）的25-羟基维生素D2和下式（）的1， 25-二羟基维生素D2是动物和人体内钙磷动态平衡的调节剂。25-羟基维生素D已经成为检测营养状况的功能性指标。维生素D缺乏症与自身免疫疾病，如1型糖尿病、多发性硬化症、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性甲状腺疾病有关；维生素D缺乏症还和心血管疾病以及癌症相关。

串联质谱法检测人血清25-羟基维生素D，能同时准确测定25-羟基维生素D2和D3的浓度，且方法特异性好、抗干扰能力强，被公认为是检测人血清25-羟基维生素D的金标准。鉴于25-羟基维生素D2和1，25-二羟基维生素D2在人类健康中的重要作用，研究其合成方法是十分必要的。本发明提供了一种新的25-羟基维生素D2和1，25-二羟基维生素D2及其串联质谱法检测人血清中VD含量用同位素标记内标物化合物的制备方法。

目前公开的文献中没有关于25-羟基维生素D2和1，25-二羟基维生素D2及其串联质谱法检测人血清中VD含量用同位素标记内标物化合物的合成。非标记的25-羟基维生素D2和1，25-二羟基维生素D2的合成方法有以下几种：

方法一：下式（Ⅲ）醛与羟基保护的磷氧化合物发生Wittig-Horner反应，得到25-羟基维生素D2和1，25-二羟基维生素D2或者中间体（US20120130133、CN201210098034）。该方法合成简便，原料易得，但Wittig-Horner反应选择性不好，收率低。

方法二：式（Ⅲ）醛类似与γ-羟基磷盐化合物发生Wittig反应，得到25-羟基维生素D2和1，25-二羟基维生素D2的中间体（Tetrahedron Lett. 1991， 32， 5397-5400;Tetrahedron 1992， 48， 5151-5162）。该方法反应选择性好，但是收率低，文章仅仅报道了中间体体的合成。

发明内容

针对以上缺点，本发明的目的在于提供的一种标记的维生素D2内标化合物的制备方法，其制备的标记的维生素D2内标化合物可用于25-羟基维生素D2和1，25-二羟基维生素D2及其串联质谱法检测人血清中VD含量。

本发明提供的技术方案如下，一种标记的维生素D2内标化合物的制备方法，其包括如下步骤：