[发明专利]一种负载双硫仑药物的PLGA生物降解微球的制备方法

说明书

本发明提供一种负载双硫仑药物的PLGA生物降解微球的制备方法，包括如下步骤：(1)将聚乳酸‑羟基乙酸共聚物与双硫仑药物溶于二氯甲烷，并将所得溶液转移到注射器中；(2)将注射器的针头没入剧烈搅拌的水中，水温高于二氯甲烷沸点，然后将双硫仑/PLGA的混合溶液逐滴滴加到水中；(3)滴加完成后搅拌所得乳液，得到不同粒径的微球，分级、取微米级微球冷冻干燥，即得。该方法结合了乳化法与沉淀法的优点，同时避开了各自的缺点，与乳化法相比，本方法无需使用表面活性剂来稳定乳滴，避免了微球表面吸附的表面活性剂对载药量的影响；与沉淀法相比，本方法未使用水溶性有机溶剂，避免了后期繁琐的清除步骤，降低了溶剂残留。

技术领域

本发明涉及一种PLGA生物降解微球的制备方法，特别涉及一种负载双硫仑药物的PLGA生物降解微球的制备方法，属于生物医用高分子材料领域。

背景技术

双硫仑(disulfiram，DSF)作为治疗酒精上瘾症药物已经使用了60多年，最近研究发现，双硫仑对肿瘤细胞具有很高的特异性，只杀死肿瘤细胞，对正常细胞没有伤害。DSF能靶向杀死肿瘤干细胞，其对肿瘤干细胞的作用机理目前还不十分清楚。DSF分子中的二硫键在血液运输的过程中容易被谷胱甘肽类还原剂破坏，在血液中的半衰期小于4分钟，使DSF在尚未达到肿瘤组织之前就已经失活。纳米粒子装载DSF可减缓其降解失活。通过脂质体的包裹可延长DSF在体内的半衰期，然而DSF脂质体18分钟的半衰期离临床应用还有很长的距离。高分子胶束特有的亲-疏水壳核结构能够在血液输送的过程中有效地保护负载于疏水核内的DSF。聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒子包裹的DSF具有长达4小时的半衰期。

由于DSF强的疏水性和纳米粒子的内部有限的空间，难以大量负载DSF。文献报道的DSF在纳米粒子中的载药量都很低，一般为3％以下。PLGA微球具有空心的球壳结构，其中空的内部结构可大大提高DSF药物的负载量。传统乳化法制备的PLGA微球表面吸附有大量的表面活性剂，尽管通过多次洗涤可以去除部分吸附的表面活性剂，然而去除得并不彻底。表面活性剂会吸附未被包裹到微球内部的DSF，导致DSF的载药量偏高，误差可达50％以上。

用沉淀法制备PLGA微球可以不用表面活性剂。沉淀法需要将PLGA溶于与水互溶的有机溶剂(如DMF和DMSO等)，利用水溶性有机溶剂在水中的快速扩散，获得PLGA微球，然而，水溶性有机溶剂难以去除干净，在微球里的残留量高，需要通过繁琐、复杂、长时间的处理过程才能彻底清除。

发明内容

发明目的：针对现有乳化法存在的表面活性剂残留高、微球表面载药量高以及沉淀法存在的有机溶剂残留量高的问题，本发明提供一种负载双硫仑药物的PLGA生物降解微球的制备方法。

技术方案：本发明所述的一种负载双硫仑药物的PLGA生物降解微球的制备方法，包括如下步骤：

(1)将聚乳酸-羟基乙酸共聚物(简称PLGA)与双硫仑药物溶于二氯甲烷，并将所得溶液转移到注射器中；

(2)将注射器的针头没入剧烈搅拌的水中，水温高于二氯甲烷沸点，然后将双硫仑/PLGA的混合溶液逐滴滴加到水中；

(3)滴加完成后搅拌所得乳液，得到不同粒径的微球，对所得微球分级、取微米级微球冷冻干燥，即得负载双硫仑药物的PLGA生物降解微球。

优选的，步骤(1)中，聚乳酸-羟基乙酸共聚物的特性粘数为0.1～0.5dL/g；其中，乳酸与羟基乙酸的摩尔比为10:1～1:1。进一步的，聚乳酸-羟基乙酸共聚物与双硫仑药物按照50:1～10:1的质量比溶于二氯甲烷。

上述步骤(2)中，剧烈搅拌的水一般是指水的搅拌速率大于等于1000r/min。进一步的，水温优选为40～70℃。其中，水的体积与步骤(1)中采用的溶剂体积之间最好满足如下比例关系：二氯甲烷与水的体积比为1:100～1:10。