[发明专利]一种检测胃癌的miRNA标志物组合及试剂盒

说明书

本发明属于分子生物学领域，公开了一种检测胃癌的miRNA标志物组合及试剂盒所述检测胃癌的miRNA标志物组合选自hsa‑miR‑29c‑3p、hsa‑miR‑424‑5p、hsa‑miR‑103a‑3p、hsa‑miR‑93‑5p、hsa‑miR‑181a‑5p、hsa‑miR‑21‑5p、hsa‑miR‑140‑5p、hsa‑miR‑30e‑5p、hsa‑miR‑142‑5p、hsa‑miR‑126‑3p、hsa‑miR‑183‑5p或hsa‑miR‑340‑5p中至少4个。采用所述检测胃癌的标志物组合可以区分胃癌患者的血清和健康人的血清。本发明所述试剂盒可以简单有效且无创的对胃癌进行检测。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体的是涉及一种检测胃癌的miRNA标志物组合及试剂盒。

背景技术

胃癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，也是死亡率最高的恶性肿瘤之一。大多数胃癌患者确诊时已错失最佳诊断和治疗时机，导致疾病进展、肿瘤转移，甚至步入终末期。从胃癌的TMN分期角度来统计，胃癌5年存活率，第一期前期为97.6％，第一期后期为94.9％，第二期为70.49％，第三期前期为56.7％，第三期后期为31.9％，第四期为6.5％。可见早期胃癌诊断是必要的。

内窥镜(胃镜)是目前诊断胃癌最有利的工具。早期胃癌在内窥镜下的表现包括黏膜颜色的异常、黏膜表面血管的消失、黏膜层凹陷或凸起增厚、不规则的结接节、溃疡周边不正常的黏膜皱折。必要时，可切取部分组织做切片活检。检测血液中的蛋白标志物可以作为诊断胃癌的参考。胃癌常用的蛋白肿瘤标志物包括：如癌胚抗原(CEA)，糖类抗原19-9(CA19-9)，糖类抗原72-4(CA72-4)和糖类抗原50(CA50)以及胃蛋白酶原等。

内窥镜检查后进行活组织检查是检测胃癌的金标准，但是，这种方法具有侵入性，会引起患者的不适和恐惧。此外，无症状患者通常不接受内窥镜检查。常规蛋白肿瘤标志物，经常被用于胃肠道癌症检测，但由于缺乏敏感性和/或特异性，不推荐用于胃癌诊断。

目前通过检测组织，血清或血浆中的miRNA肿瘤标志物，作为诊断胃癌的参考。miRNA是一类长约19-24nt的非编码单链小RNA分子，绝大多数miRNA可以通过与靶基因3’UTR区互补结合，抑制靶基因翻译成蛋白质，进而在细胞、组织或个体水平上影响生物体的生长发育，并参与多种疾病过程。miRNA的表达谱具有明显的组织特异性，在不同肿瘤中具有特定的表达模式。这些特点使得miRNA有可能成为肿瘤诊断新的生物学标记和治疗靶标。qPCR是检测已知miRNA表达最常用的方法，快速、简单、重复性好，而且可以非常灵敏地、精确地定量分析miRNA的表达，是临床应用中最主要的方法，这为循环miRNA作为肿瘤无创诊断标志物提供了可靠的技术保障。

尽管现有的研究发现了许多非常有前景的胃癌早期诊断血清miRNA，但这些结果并不一致，并且不能相互验证。原因在于各个研究之间样本的选取、收集、保存过程不统一。使用不同方法分离、储存的外周血样本，其生物标志物含量也会有所不同。个体之间的体液环境，遗传等非癌症因素均会影响miRNA的表达，需要大量的人群样本以排除影响。此外，miRNA的检测存在一定的难度。因此最终能用于胃癌筛查的血清miRNA生物标志物以及生物标志物组合标志物还未见定论。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种检测早期胃癌的标志物组合及试剂盒，以区分胃癌患者的血清和健康人的血清，区分胃癌患者的血清和胃炎患者的血清，可以简单有效且无创的对胃癌进行检测。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：