[发明专利]贝莱斯芽孢杆菌118及其生物菌剂与应用

说明书

本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)118及其应用，该菌株保藏编号为GDMCC No.60625，于2019年04月04日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)；该菌株防控番茄青枯病和香蕉枯萎病、促进植株生长、高产生物膜和有效定殖根际等优点；该菌株共有5个胞外功能δ因子，包括δ^M,δ^W,δ^X,δ^V和ylaC。其中δ^X基因具有调控生物膜皱褶和花瓣形成、提高生物膜产量、加快蠕动和游动速度、和提高根际定殖率的功能；ylaC基因具有调控生物膜形态的功能；利用该菌株制备生物菌剂，既可以防治土传病害又能促进植物生长，应用前景广阔；属于农业生物技术领域。

技术领域

本发明涉及植物土传病害生物防治领域，是一种微生物及其应用，具体涉及一种贝莱斯芽孢杆菌118(Bacillus velezensis)及应用。

背景技术

作物土传病害是农业生产中制约产量及品质的主要问题之一，如枯萎病、青枯病、疫病、根腐病和纹枯病等在华南地区普遍发生，轻则减产，重则造成作物绝收。香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)引起的真菌性土传病害，番茄青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的细菌性土传病害。作物土传病害主要通过改进栽培措施、物理消毒、化学农药等方式来防治，但化学农药的大量使用，不仅造成农作物农药残留，还造成环境污染，破坏生态环境。微生物农药具有安全无害、双减增效、不易产生抗药性等优点，在国家绿色农业中日显益重要。为此，挖掘新型高效生防微生物资源及其高效基因资源，对作物土传病害的生物防治和促进植株生长均具有重要的意义。

贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)是新型的植物防病促生微生物，为了与工业发酵用的解淀粉芽孢杆菌DSM9等区分开，Fan等于2017正式启用新名称为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。贝莱斯芽孢杆菌共有有5个胞外功能(extracytoplasmicfunctional sigma factor， ECF)σ因子(δ^M、δ^X、δ^W、δ^V和ylaC)，胞外功能(ECF)σ因子是应答各种胁迫环境的转录调节因子(Luo et al.，2010；Onozawa et al.，2015)，具有调控细胞相关功能基因表达的功能，从而提高菌株在环境中的竞争、拮抗、运动和定殖等各种生存能力。为此，探究ECFσ因子在细菌生物膜形成、游动和蠕动、根系定殖等方面的调控作用，对提高生防菌剂的田间定殖和生防潜力具有重要的实际意义。

通过游动和蠕动，产生生物膜而粘附植株根系而定殖，是生防菌剂田间防效和肥效发挥的前提，为了探究σ因子在根际定殖中的作用，采用长臂同源多聚酶链式反应(longflanking homology polymerase chain reaction，LFH-PCR)技术分别构建了5个σ因子(δ^M、δ^X、δ^W、δ^V、 ylaC)的基因缺失株。比较野生株和突变株之间的生物膜形态和产量、游动和蠕动、粘附根系等差异，筛选相应的高效基因，可望解决当前生防菌剂田间效果不稳定性的技术瓶颈。

发明内容

本发明的第一目的在于根据现有技术中上述问题，提供一种新型的兼具防病促生、高产生物膜和高效根系定殖功能的贝莱斯芽孢杆菌118(Bacillus velezensis)。

本发明的第二个目的在于提供上述贝莱斯芽孢杆菌118制备的生物菌剂。

本发明的第三个目的是在于提供贝莱斯芽孢杆菌118及其生物菌剂的应用。

为此，本发明的第一个目的通过以下技术方案实现：