[发明专利]南方地区甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法

说明书

本发明涉及植物杂交育种领域，尤其涉及一种南方地区适栽甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法。该方法结合欧洲甜樱桃和中国樱桃的优点，以‘欧洲甜樱桃’为母本，‘中国樱桃’为父本进行了种间远缘杂交。针对远缘杂交胚败育的问题，对杂交胚进行了胚挽救。确定了各杂交组合胚挽救适宜取材时期，杂种幼胚萌发、继代扩繁、生根培养各自所需外源生长调节剂的浓度和比例以及适宜炼苗移栽方法。应用该技术建立的南方地区甜樱桃与中国樱桃种间胚挽救体系，胚萌发率达到80.00%，继代培养杂种新梢增殖系数达到了5.0，生根培养生根率90.91%，胚培苗长势好，生长健壮，叶色绿，炼苗移栽成活率达到77.27%。

技术领域

本发明涉及植物杂交育种领域，尤其涉及一种南方地区适栽甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法。

背景技术

樱桃是蔷薇科（Rosaceae）李属（Prunus）樱桃亚属（Ceraras）乔木，果实味道甜美，营养价值高，其中铁元素含量居水果首位，素有“百果第一枝”的美誉。受地理及气候条件的制约，长期以来我国甜樱桃的主产区集中于大连、烟台等北方地区，南方地区因夏季高温高湿及冬季需冷量不足等因素导致甜樱桃只花不果无经济产量。近年来，长江中下游地区种植甜樱桃初有所成效，通过品种选育及栽培技术革新，解决了一直以来困惑的‘花而不实’无经济产量的关键问题，取得了突破性进展。然而现有品种及砧木多以北方主产区为育种对象，并不适合冬季温暖且夏季高温高湿的南方地区发展，若要进一步发展南方甜樱桃，不仅做到有产，更要做到质优，则必须开展自主选育工作，从品种和砧木2个育种方向尽快为南方甜樱桃发展提供种质资源。

我国的主栽樱桃为中国樱桃和欧洲甜樱桃。中国樱桃（Prunus. pseudocerasusL.）原产于我国，果实成熟期早、自花结实、抗病性强。但果个小、果皮较软，不耐贮运。欧洲甜樱桃（Prunus. avium L.）原产欧洲及亚洲西部，果实大，果肉厚实、较耐贮运。将欧洲甜樱桃和中国樱桃优良相结合，进行欧洲甜樱桃和中国樱桃种间远缘杂交，对核果类果树杂交育种工作有重要的意义，尤其对南方甜樱桃的适宜砧木选育意义深远。但远缘杂交不亲和及胚早期败育给甜樱桃杂交育种带来障碍，胚挽救技术的出现与发展为克服上述问题提供了一条有效的解决途径。20世界60年代胚挽救技术应用于我国的果树育种工作中，它是对早期败育、退化或无法播种成苗的胚，进行早期离体培养的技术手段，对于克服远缘杂交不亲和提高种间杂种萌发率等有重要的作用。

中国发明专利（公开号CN105284620A，公开日2016.02.03）公开了一种特早熟桃杂交胚挽救成苗的方法，摘取特早熟桃七到八分熟的果实，果实消毒后破核取出胚珠并接种在生长培养基中进行胚珠培养，再将幼胚接种至分化培养基中进行幼胚分化培养，将打破休眠的胚进行胚萌发培养，再进行移栽。该专利进行特早熟桃杂交胚挽救时机适宜，在胚珠培养与胚萌发过程中开发出了合适的培养基，提高了杂交胚的发育率，提高了正常胚的比例，胚挽救苗整齐健壮，胚生长力可以达到83％以上，分化力达到60％，培养力达到50％，大大提高了特早熟桃杂交后代胚挽救成苗的基数，从而能得到更多的特早熟桃杂交后代植株群体，提高了特早熟桃杂交胚挽救成苗率，该方法可操作性强、容易掌握。

但在胚挽救过程中，胚龄、胚皮、低温层积方式、胚消毒方式、培养基类型、碳源、植物生长调节剂的种类及配比以及幼苗移栽方法等因素都会对胚挽救成功率造成影响。南方地区种植甜樱桃果实发育周期短，成熟期提前，幼胚取材时间，胚败育时间及胚培养方法与北方地区存在一定差异，故建立适合于南方甜樱桃的杂种胚胚挽救体系可为甜樱桃远缘杂交育种及扩大种质资源多样性工作奠定基础。

发明内容

本发明的目的是提供一种南方地区适栽甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法。初步建立南方甜樱桃杂种胚胚挽救体系，克服甜樱桃种间杂交胚败育问题，促进杂种胚生长发育，提高其萌发率及成苗率，加快甜樱桃杂交育种工作进度。