[发明专利]一种腺嘌呤碱基编辑工具及其用途有效
| 申请号： | 201910382569.1 | 申请日： | 2019-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN110029096B | 公开（公告）日： | 2023-05-12 |
| 发明（设计）人： | 黄诗圣;李向阳;黄行许 | 申请（专利权）人： | 上海科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N9/78;C12N15/55;C12N15/90 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 严晨;许亦琳 |
| 地址： | 201210 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 嘌呤 碱基 编辑 工具 及其 用途 | ||
1.一种腺嘌呤碱基编辑器，包括ecTadA-ecTadA*二聚体片段和SpCas9-NG D10Anickase片段，所述ecTadA-ecTadA*二聚体片段包括ecTad片段和ecTadA*片段，所述SpCas9-NG D10A nickase片段的氨基酸序列为如SEQ ID NO. 59所示的氨基酸序列；
所述腺嘌呤碱基编辑器自5’端至3’端依次包括ecTadA-ecTadA*二聚体片段和SpCas9-NG D10A nickase片段；
所述ecTadA-ecTadA*二聚体片段自5’端至3’端依次包括ecTad片段和ecTadA*片段；
所述腺嘌呤碱基编辑器还包括核定位信号片段，所述核定位信号片段的氨基酸序列如SEQ ID NO. 60所示；
所述腺嘌呤碱基编辑器的氨基酸序列如SEQ ID No. 61所示。
2.如权利要求1所述的腺嘌呤碱基编辑器，其特征在于，所述ecTadA片段的氨基酸序列为
如SEQ ID NO. 57所示的氨基酸序列。
3.如权利要求1所述的腺嘌呤碱基编辑器，其特征在于，所述ecTadA*片段的氨基酸序列为如SEQ ID NO. 58所示的氨基酸序列。
4.一种分离的多核苷酸，编码如权利要求1-3任一所述的腺嘌呤碱基编辑器。
5.一种构建体，所述构建体含有如权利要求4所述的分离的多核苷酸。
6.一种表达系统，所述表达系统含有如权利要求5所述的构建体或基因组中整合有外源的如权利要求4所述的多核苷酸。
7.如权利要求6所述的表达系统，其特征在于，所述表达系统的宿主细胞选自真核细胞或原核细胞。
8.如权利要求1-3任一所述的腺嘌呤碱基编辑器、如权利要求4所述的分离的多核苷酸、如权利要求5所述的构建体或如权利要求6-7任一权利要求所述的表达系统在基因编辑中的用途。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述用途具体为在真核生物的基因编辑中的用途。
10.一种碱基编辑体系，包括如权利要求1-3任一所述的腺嘌呤碱基编辑器和sgRNA。
11.一种基因编辑方法，包括：通过如权利要求1-3任一所述的腺嘌呤碱基编辑器、或如权利要求10所述的碱基编辑体系进行基因编辑。
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