[发明专利]醛酮还原酶BmAKR1及其突变体和应用有效
| 申请号： | 201910375807.6 | 申请日： | 2019-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN110257350B | 公开（公告）日： | 2022-10-11 |
| 发明（设计）人： | 游松;秦斌;张文鹤;祝天慧;张飞霆;郭继阳;张瑞;李衡宇 | 申请（专利权）人： | 沈阳药科大学 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/62;C12R1/19 |
| 代理公司： | 沈阳飞扬灵睿知识产权代理事务所(普通合伙) 21255 | 代理人： | 靳玲 |
| 地址： | 110016 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 还原酶 bmakr1 及其 突变体 应用 | ||
1.醛酮还原酶的突变体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID No. 4，8所示。
2.一种核酸，其能够编码权利要求1所述的醛酮还原酶突变体。
3.如权利要求2 所述的核酸，其核酸序列如SEQ ID No. 3，7所示。
4.一种表达载体，该载体含有权利要求2 或3 所述的核酸且能在宿主细胞中进行表达。
5.一种宿主细胞，其含有权利要求2 或3 的核酸或权利要求4 所述的表达载体。
6.权利要求5所述的宿主细胞，所述的宿主细胞为大肠杆菌。
7.权利要求1所述的醛酮还原酶突变体在还原α-酮酸酯类化合物中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的还原方法为：在pH 5-7 的磷酸盐缓冲液溶液中，在葡萄糖脱氢酶，葡萄糖和NADP+存在下，在权利要求1所述的醛酮还原酶突变体的催化下，对α-酮酸酯类化合物进行还原，生成光学活性手性仲醇。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，醛酮还原酶用量为0.02-40g/L，葡萄糖脱氢酶用量为0.01-5g/L，葡萄糖用量为6-200g/L，NADP+用量为0.1-0.5mmol，α-酮酸酯类化合物浓度为3-100g/L，所述缓冲液为pH5-7的磷酸盐缓冲液，反应温度是30-40℃。
10.如权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述的α-酮酸酯类化合物如式（I）所示:
R1为C1-C4烷基或者苯基；
R2为C1-C4烷基。
11.如权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述的α-酮酸酯类化合物中，R1为苯基；R2为乙基。
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