[发明专利]生化样品原位处理装置及磷酸化蛋白的质谱成像方法

说明书

本发明公开一种生化样品原位处理装置及磷酸化蛋白的质谱成像方法，涉及分析化学技术领域。所述生化样品原位处理装置包括：生化处理槽、被配置在生化处理槽内的载玻片托，以及被配置在载玻片托内的载玻片和双层磁铁，所述双层磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片；所述磷酸化蛋白质谱成像方法利用四氧化三铁悬浮液吸附固定磷酸化肽段，随后即可进行质谱检测。本发明利用磁场技术和磁性材料对生化样品进行原位处理，并应用于磷酸化蛋白的质谱成像中。

技术领域

本发明涉及分析化学技术领域。更具体地，涉及一种生化样品原位处理装置及磷酸化蛋白的质谱成像方法。

背景技术

生物组织样品表面生化分子的处理是样本处理的一种模式，广泛应用于各种生物组织表面分析的样品前处理过程中，例如动物组织表面的染色，免疫组化，透射电镜，冷冻电镜等样品的表面处理等。简单的表面生化处理，如染色、免疫组化，生化分子在样品表面仅发生简单的非共价吸附或共价键合，不容易发生空间位移。但在较为复杂的、多步骤的样品表面生化处理过程中，样品表面的生化分子受多次物理和化学作用，会从其原有的位置发生位移，失去原有的空间位置信息。目前的表面生化处理领域缺少有效的原位处理技术，这在一定程度上阻碍了基于生物组织样品表面生化分子的处理后的质谱成像技术的发展和推广应用。简单的处理，无论是非共价吸附或共价键合，均不能实现组织表面生化分子所需的完全的生化处理，组织表面生化分子经过复杂的生化处理步骤，不能保留其原位的信息，满足不了质谱成像的要求。因此需要设计出一种基于原位固定的生化样品表面处理技术装置，使得组织样品表面的分子在受到多次物理和化学作用的界面处理时，保持空间位置相对处于原位，对基于生物组织样品表面生化分子处理后的质谱成像技术的建立和推广应用具有一定的实用意义。

蛋白质的磷酸化和去磷酸化这一可逆过程调节着包括细胞增殖、发育、分化、信号传导、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩以及肿瘤发生等过程在内的几乎所有生命活动。因此，在组织切片表面原位解析磷酸化蛋白的分布及其修饰的动态变化对研究组织内部生物学信号通路及各种生命运动机理有重要的意义。截至目前为止，生物组织样品表面生化大分子------磷酸化修饰蛋白质的成像一般用免疫组化技术，随着质谱技术的发展，使得磷酸化蛋白质的质谱成像技术成为可能。目前为止，尚没有关于磷酸化蛋白质的质谱成像的报道，因此针对磷酸化蛋白质的质谱成像分析技术具有很强的实用意义。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种可利用磁场技术和磁性材料对生化样品进行原位处理的装置。

本发明的另一个目的在于提供一种利用上述装置进行磷酸化蛋白的质谱成像方法。

为达到上述第一个目的，本发明采用下述技术方案：

一种生化样品原位处理装置，包括：生化处理槽、被配置在生化处理槽内的载玻片托，以及被配置在载玻片托内的载玻片和双层磁铁；

所述载玻片托包括用于固定载玻片的第一本体部，以及结合固定在所述第一本体部底部的用于固定所述双层磁铁的第二本体部；

所述第二本体部包括有一端开口的容纳腔，所述双层磁铁位于所述容纳腔内；所述载玻片位于所述双层磁铁在第一本体部上的投影所限定的区域内，所述双层磁铁的磁力线垂直穿过所述载玻片。

优选地，所述第一本体部包括用于放置载玻片的卡槽以及用于固定载玻片的第一卡子，所述载玻片通过第一卡子被水平固定在所述卡槽内；

所述第二本体部还包括有用于固定所述双层磁铁的第二卡子，所述双层磁铁通过第二卡子被水平固定在所述容纳腔内。

优选地，所述生化样品原位处理装置还包括用于提拉载玻片托的提绳。

优选地，所述载玻片的厚度为0-2mm，但不能为0mm；载玻片与双层磁铁之间的距离为0-2mm。

优选地，所述载玻片与所述双层磁铁之间设有用于支撑所述载玻片的隔离板，所述隔离板的厚度为0-2mm。