[发明专利]一种杨树桑黄多糖的提取方法

说明书

本发明提供了一种杨树桑黄多糖的提取方法，包括将桑黄子实体粉碎至1‑5目，用生理盐水浸泡8～24h，离心后收集残渣；然后将桑黄子实体残渣在110～130℃沸水下煮20～40min，离心后收集残渣；进一步在残渣中加水冷冻24‑36h后解冻；在解冻混合物中加水得到混合液，再将混合液中加入复合酶，50‑60℃下酶解2～4h，离心分离得上清液；最后将上清液用树脂吸附后透析、浓缩和冷冻干燥得到杨树桑黄多糖。本发明提出的杨树桑黄多糖的提取方法，具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的活性，并且相对于化学方法提取纯化的多糖具有良好的生物相容性，不会带来炎症反应，本发明杨树桑黄多糖可以用于抗肿瘤的药物或保健品中。

技术领域

本发明涉及药物提取技术领域，具体而言，涉及一种杨树桑黄多糖的提取方法。

背景技术

桑黄是一种珍贵的药用真菌。因该菌在我国中南地区通常生长在桑属植物上，子实体颜色鲜黄而得名。桑黄作为传统中药在中国已经有上千年历史，在历代本草著作中，桑黄又名桑臣、桑耳、桑黄菇等。桑黄一般会寄生于桑树、杨树、白桦、桃树、柳树等阔叶树的树干上，因其着生树种不同，品种也不相同，成分也千差万别，这也导致了大量科学报道的桑黄多糖成分千差万别，其根本原因就是混淆了原材料的来源。杨树桑黄(Phellinusvaninii Ljup)是桑黄的一种，生于杨树。也称“北韩桑黄”，出产于吉林长白山一带。目前市场上流通量最大，韩国人最易接受的桑黄，与韩国栽培的菌种和形状最接近的品种，具有抗肿瘤、增强免疫力、抗氧化和护肝等功能。

杨树桑黄子实体呈木质化，细胞壁中含有大量几丁质和纤维素类大分子，造成杨树桑黄多糖提取困难。现有的研究结果中，提取方法主要为水提醇沉，提取率较低。在之前的研究中，将脱脂后的杨树桑黄子实体进行逐步破壁，先后用热水和碱液提取了两种多糖，其中热水浸提的多糖产量较低，生物活性也较差；进一步用碱液提取的多糖产量较高，但是在后续研究中发现，碱提多糖会刺激巨噬细胞产生大量炎症因子，可能会带来炎性反应，对其生物医用造成一定的负面作用。

因此，提供一种杨树桑黄多糖的提取方法，提高杨树桑黄多糖产率并获得具有良好生物相容性的的杨树桑黄多糖是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

本发明正是基于上述技术问题至少之一，提出了一种杨树桑黄多糖的提取方法，首先在生理盐水和热水反复浸提除杂之后，采取了低温冷冻-微波快速解冻的方法反复冻融桑黄子实体细胞，充分破坏其细胞壁结构，提高杨树桑黄多糖的提取产率；其次采用大孔树脂的吸附作用脱蛋白和脱去色素，在保证最大限度除杂的效果之下还不引入其他化学小分子，大大降低了所提多糖的带来的炎症反应。

有鉴于此，本发明提出了一种杨树桑黄多糖的提取方法，包括如下步骤：

(1)将桑黄子实体粉碎至1-5目，用生理盐水浸泡8～24h，重复1～3次，离心后收集残渣；

(2)将桑黄子实体残渣在110～130℃沸水下煮20～40min，重复1～3次，离心后收集残渣；

(3)在步骤(2)中的残渣中加水，-15—-10℃冷冻24-36h后解冻；冷冻-解冻过程重复1-3次；

(4)在步骤(3)的解冻混合物中加水得到混合液，再将混合液中加入复合酶，50-60℃下酶解2～4h，离心分离得上清液；

(5)上清液用树脂吸附除杂1～3次，后透析、浓缩和冷冻干燥得到杨树桑黄多糖。

本发明提供的一种杨树桑黄多糖的提取方法，大体上为物理提取过程，在提取过程中并不引入其他化学小分子，杨树桑黄多糖的提取产率为6.8％，提取到的杨树桑黄多糖具有良好的生物相容性，且具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的活性，不会带来炎症反应。

进一步的，步骤(2)桑黄子实体残渣与沸水的加入量为60-80g/L。

进一步的，步骤(3)中残渣与水的加入量为200g/L。