[发明专利]联合定量检测五项心脏标志物试剂盒及制备方法

说明书

本发明公开了一种复合型定量检测超敏C反应蛋白(hs‑CRP)、髓过氧化酶(MPO)、脂蛋白磷脂酶A2(Lp‑PLA2)、氧化低密度脂蛋白(ox‑LDL)、F2‑异前列腺素(F2‑isop)荧光免疫层析检测试剂盒的制备方法，包括干燥剂、密封袋和检测卡。所述检测卡包括五联体扣卡与试剂条；所述试剂条包括样品垫、结合垫、滤血膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC底板，所述结合垫包被有hs‑CRP抗体、MPO抗体、Lp‑PLA2抗体、ox‑LDL抗体、F2‑isop抗体；所述抗体为单单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段或嵌合抗体的一种或多种配对组合。本发明方法具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化、假阳性达到了最小化、检测效率高，检测成本低等突出优点，有重要的实用意义。

技术领域

本发明涉及临床医学检验领域，具体地说，涉及一种联合定量检测超敏C反应蛋白、髓过氧化酶脂蛋白磷脂酶A2、氧化低密度脂蛋白和F2-异前列腺素荧光免疫层析检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

心血管性疾病是临床上常见的急危重症，病死率高、病情凶险，严重威胁着人类的健康与生命。有资料表明，心血管病的基本病理变化是动脉粥样硬化，近年来的研究显示炎症反应是动脉粥样硬化及心血管疾病的基础，尤其是慢性炎症被认为能增加动脉损伤疾病风险，使动脉粥样硬化斑块易于破裂，在动脉粥样硬化的形成中起了关键作用。动脉损伤是全身心血管系统的一种慢性炎症反应结果。但由于动脉损伤早期缺乏明显的临床表现，所以确诊时多处于疾病的中晚期，导致患者的预后差和过多的医疗花费。于是寻找有效的监测早期动脉病变、预测严重心脑血管病风险的心脑血管标志物具有重要的临床意义。

hs-CRP是炎症病变的敏感标志物，能准确的检测低浓度C反应蛋白。临床试验表明，血清hs-CRP水平随着冠心病病情呈渐进性升高趋势。hs-CRP是反映炎性过程的敏感、精确的指标，体内轻微的炎症就可以导致hs-CRP升高，流行病学研究显示增高的Hs—CRP可以预示10年内的CHD发生。Lp-PLA2是钙离子非依赖性的分子量为45KDa的分泌型蛋白。Lp-PLA2由巨噬细胞产生，是血管内皮炎症的标记物，不受其他炎症性疾病影响。可以特异性检测早期血管炎症的发生。多项临床试验研究表明，基础Lp-PLA2水平较高者以后发生心血管事件的比例较基础Lp-PLA2水平较低者显著升高。MPO是一种中性溶酶体酶，由活化的中性粒细胞、单核细胞及巨噬细胞产生，参与人体内多种炎症反应和氧化应激过程。MPO升高提示患者可能存在冠状动脉炎症，但血管未完全堵塞，并未引起心肌坏死，可以用于预测早期不良心血管事件发生的可能性。冠心病患者血浆中ox-LDL水平是正常对照者的2倍。血液F2-isop水平与冠心病的病变范围和严重程度密切有关。本发明一种联合定量检测hs-CRP、MPO、Lp-PLA2、ox-LDL和F2-isop荧光免疫层析检测试剂盒将以上五者结合，通过联合检测患者血液hs-CRP、MPO、Lp-PLA2、ox-LDL和F2-isop水平，可以更加准确有效地预测患者严重心脑血管病风险的可能，实现严重心血管事件早期诊断、风险预测和严重性评估。

中国发明专利CN201810746660.2公开了一种联合定量检测炎症标志物血清淀粉样蛋白A、超敏C反应蛋白与降钙素原检测试纸，该方法仅涉及炎症标志物，一般是产生验证了，才会检测出来，无法实现风险评估。目前临床应用的单一指标检测产品只能同时检测一个指标，五个指标需要五个检测试剂才能完成，具有检测效率低、成本高、耗材浪费等缺陷。