[发明专利]具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体及制备方法

说明书

本发明公开了一种具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体及制备方法,方法为：(1)将二水氯化钙溶解于水中为溶液一；将无水碳酸钠溶解于水中为溶液二：将溶液二加入搅拌的溶液一中，沉淀，水洗，离心；(2)向沉淀中加水、加用多酚配制的液体，混匀；加金属离子水溶液，混匀，加3‑(N‑吗啉)丙磺酸水溶液，混匀，离心，水洗，离心得沉淀；(3)重复步骤(2)；(4)加EDTA水溶液，混匀，放置，离心，得沉淀；(5)重复步骤(4)；(6)水洗沉淀；水混悬，冻干。实验证明本发明的微囊载体具有良好H₂O₂清除能力，在小鼠下肢缺血模型中证实其促微血管生成效果。

技术领域

本发明涉及一种具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊及制备方法及在制备下肢缺血治疗药物的应用，属于生物医学、微囊载体、药物递送治疗领域。

背景技术

下肢缺血疾病发病率高，严重患者年截肢率高达30％。目前此类疾病的临床手术及介入治疗存在术后血管再狭窄或闭塞等问题，而基因及干细胞治疗的效果也并不理想，且费用较高；因此有效改善缺血微环境并诱导血管生成是治疗此类疾病的关键。近年生物材料技术的研究已经涵盖多种疾病领域。金属离子，如金属铜离子(Cu²⁺)、金属锌离子(Zn²⁺)等已经在多种疾病研究中被证实具有促血管生成作用，但大剂量金属粒子对机体会有毒副作用。实现金属离子缓释既可以发挥其生理功能同时也能降低其毒副作用。目前，尚未有具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体的报道。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体。

本发明的第二个目的是提供一种具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体的制备方法。

本发明的第三个目的是提供具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体在制备下肢缺血治疗药物的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体的制备方法，包括如下步骤：

(1)将10-2000mg二水氯化钙溶解于10-50ml水中，得到溶液一；将10-2000mg无水碳酸钠溶解于10-50ml水中，得到溶液二：将全部溶液二加入搅拌的全部溶液一中，再持续搅拌10-60s，静止1-10min，在2000rpm-13000rpm，离心3-5min，沉淀用水洗1-3次，每次1-50mL，再离心；搅拌速度为400-700rpm；

(2)向步骤(1)获得的沉淀中加入水至4-20mL；加入0.5-5mL 1-100mg/mL的以水为溶剂配制的含多酚的液体，混匀；加入0.5-5mL 0.5-50mg/mL金属离子水溶液，混匀，加入0.5-50mL1-20mM pH＝7.4的3-(N-吗啉)丙磺酸水溶液，混匀，在2000-13000rpm条件下，离心5-10min；用水洗1-3次，离心得沉淀；

(3)重复步骤(2)2-4次；

(4)将步骤(3)获得的产物加入10-30mL、5-100mM EDTA水溶液中，混匀，放置10-30min，在2000-13000rpm条件下，离心，得沉淀；

(5)重复步骤(4)0-2次；

(6)用水洗步骤(5)获得的沉淀2-4次；将所得沉淀用水混悬，冻干得到具有ROS响应性及金属离子缓释功能的金属多酚微囊载体。

多酚为儿茶酚、单宁酸、邻苯三酚、芦丁、槲皮素、没食子酸、鞣酸、儿茶酚改性的海藻酸或明胶。

金属离子为铁离子、铜离子、锌离子、镁离子、铝离子、锰离子或钛离子。