[发明专利]一种富集高活性脂肪颗粒细胞和脂肪干细胞的脂肪移植物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种富集高活性脂肪颗粒细胞和脂肪干细胞的脂肪移植物的制备方法，包括如下步骤：

（1）用注射器手动负压抽脂，去水，得到颗粒脂肪；

（2）向颗粒脂肪中加入生理盐水，混匀，离心，收集上层脂肪，得到脂肪层；

（3）将步骤（2）中得到的脂肪层分为上层脂肪层和下层脂肪层；

取所述下层脂肪层，消化，离心，去除红细胞后用人血白蛋白溶液重悬，得到细胞悬液；

通过使用4mm口径双通管将上层脂肪层转移至注射器一中，通过2mm口径的鲁尔双通管连接注射器一和注射器二，注射器一和注射器二中均预留负压体积，经多次推注后，得到推注后上层脂肪层，于最后一次推注时将注射器一中的推注后上层脂肪层推注入注射器二中，混匀，得到混匀脂肪，推注次数为3~5次，每次推注速度为5～10 mL/秒；以1000~1500g的离心力离心混匀脂肪，离心时间为2~5min，得到分层的脂肪，收集中间层；

（4）将步骤（3）中下层脂肪层处理得到的细胞悬液加入到上层脂肪层处理得到的中间层中，混匀，即为所述富集高活性脂肪颗粒细胞和脂肪干细胞的脂肪移植物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述注射器一中预留负压体积与上层脂肪层的体积比为1：4。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：将注射器一中的推注后上层脂肪层推注入注射器二中前，所述注射器二中预留负压体积与所述推注后上层脂肪层的体积比为1：4。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中手动负压抽脂时所用抽脂针的孔径为1.2~2 mm，所用抽脂针的孔数为3~5个，所述注射器的量程为10~20 mL；所述步骤（2）中颗粒脂肪与生理盐水的体积比为1:2，所述步骤（2）中离心条件为300～500 g离心3 min。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中上层脂肪层为步骤（2）中脂肪层的上4/5，所述步骤（3）中的下层脂肪层为所述步骤（2）中的脂肪层的下1/5。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）得到的细胞悬液中的SVF-cells活性大于80%；所述步骤（3）得到的中间层中颗粒脂肪细胞活性在60%以上。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中添加的细胞悬液中SVF-cells的浓度为5×10⁵～5×10⁶个/mL。

8.一种根据权利要求1-7任意一项所述的制备方法制备得到的富集高活性脂肪颗粒细胞和脂肪干细胞的脂肪移植物。

9.一种权利要求8所述的富集高活性脂肪颗粒细胞和脂肪干细胞的脂肪移植物在制备脂肪移植物或非治疗形式的脂肪移植中的应用。