[发明专利]基于氧化石墨烯的生物传感器的制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种基于氧化石墨烯的生物传感器的制备方法和应用，所述制备方法包括：1)制备氧化石墨烯：通过Hummers法制备氧化石墨烯；2)将一端修饰Cy5的DNA水溶液与所述氧化石墨烯溶液混合得到混合液；3)取所述混合液与肿瘤细胞液均匀混合，构建成生物传感器；其中，在步骤2)中，所述DNA序列为GGGGGGAAAAATTTTTTTTTTACAGCAGATCAGTCTA‑Cy5或GGGGGGGGGAAAAATTTTTTTTTTACAGCAGATCAGTCTA。上述生物传感器的制备方法简单、周期短，且所制得的生物传感器的灵敏度高、特异性强。

技术领域

本发明涉及生物传感器技术领域，具体的说，涉及到用于检测白血病细胞的石墨烯生物传感器的制备方法和应用。

背景技术

白血病是造血组织克隆性恶性疾病，是造血干、祖细胞的恶性病变。表现为贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和骨骼疼痛。近几年，随着环境污染的加重，白血病越来越常见，我国各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位。

生物传感技术是一门由生物、化学、物理、医学、电子技术等多种学科互相渗透成长起来的高新技术，生物传感器是一种将生物感应元件的专一性和一个能够产生与待测物浓度成比例的信号传导器结合起来的分析装置。由于其具有选择性好、灵敏度高、分析速度快、成本低、能在复杂体系中进行在线连续监测的特点，已在生物、医学、环境监测、食品、医药、及军事医学等领域显示出广阔的应用前景。

白血病主要是依靠细胞形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等检测方法来进行诊断和检测分型。细胞形态学受主观因素影响，临床诊断的一致率仅为70％左右。核型分析和显带技术等细胞遗传学方法是在全基因组水平筛查染色体易位，容易漏检许多染色体的微小异常。免疫学方法具有较高的假阳性率和假阴性率，并且无法做到早期诊断。目前，国内外广泛使用的生物标记物构建生物传感器来检测白血病细胞，然而大多数生物传感器灵敏度低、特异性差及检测范围窄的缺陷。

发明内容

基于此，有必要针对上述生物传感器灵敏度低、特异性差及检测范围窄的技术问题，提供一种基于氧化石墨烯的生物传感器的制备方法和应用。

本发明为解决上述技术问题，采用如下技术问题：

一种基于氧化石墨烯的生物传感器的制备方法，包括：

1)制备氧化石墨烯：通过Hummers法制备氧化石墨烯；

2)将一端修饰Cy5的DNA水溶液与所述氧化石墨烯溶液混合得到混合液；

3)取所述混合液与肿瘤细胞液均匀混合，构建成生物传感器；

其中，在步骤2)中，所述DNA序列为

ggggggaaaaattttttttttacagcagatcagtcta-cy5或

gggggggggaaaaattttttttttacagcagatcagtcta-cy5

在其中一个实施例中，在2)步骤中，所述修饰Cy5的DNA水溶液与所述氧化石墨烯溶液的体积比为1：5。

在其中一个实施例中，在2)步骤中，所述修饰Cy5的DNA水溶液与所述氧化石墨烯溶液的体积比为1：2。

在其中一个实施例中，在2)步骤中，所述修饰Cy5的DNA水溶液的浓度为0-0.06nmol/L。

在其中一个实施例中，在2)步骤中，所述修饰Cy5的DNA水溶液的浓度为0.02-0.04nmol/L。

在其中一个实施例中，在3)步骤中，所述肿瘤细胞为白血病细胞。

在其中一个实施例中，在3)步骤中，所述混合液与肿瘤细胞的体积比为1：5。