[发明专利]用于区分肝移植供受体细胞的特异性引物对、探针、试剂盒及区分方法

说明书

本发明公开了一种用于区分肝移植供受体细胞的特异性引物对，该特异性引物对由Acry‑Mlt‑AS2引物和Mlt‑S1N引物组成。通过实验证明了本发明的方法可以用来区分肝移植供受体细胞，肝移植供受体细胞被区分可进一步探究供体肝脏固有免疫和受体循环免疫在肝脏中的作用及信息交通方式，以及免疫抑制剂对这两部分免疫的抑制作用有什么差异等。本发明所提供的方法对于揭示肝脏固有免疫的作用机制和防止肝癌复发有非常重要的意义。

技术领域

本发明涉及一种区分供受体细胞的方法，具体地说是一种肝移植后区分供受体细胞的特异性引物对、探针、检测试剂盒及区分方法。

背景技术

据2012年的统计数据显示，全球每年新发肝癌782500例，死亡745500例，中国的新增病例和死亡人数均占全球总数的50％。肝移植是根治原发性肝癌的重要方法，但术后高复发转移率严重影响了其治疗效果。因此，探究供体肝脏固有免疫和受体循环免疫在肝脏中的作用及信息交通方式，以及免疫抑制剂对这两部分免疫的抑制作用有什么差异，对于我们揭示肝脏固有免疫的作用机制和防止肝癌复发都有非常重要的意义。然而，至今一直没有合适的可准确区分供体和受体细胞的手段。

如何有效区分肝移植后的供受体细胞，仍然是本领域技术人员研究的重点。

发明内容

本发明的首要目的是提供一种可有效区分肝移植后供受体细胞的特异性引物对。

本发明的第二目的是提供一种可有效区分肝移植后供受体细胞的引物探针组。

本发明的第三目的是提供一种可以有效区分肝移植后供受体细胞的成套引物。

本发明的第四目的在于提供一种含有上述成套引物的检测试剂盒。

本发明的第五目的在于提供一种基于上述检测试剂盒的有效区分肝移植后供受体细胞的检测方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种用于区分肝移植供受体细胞的特异性引物对，所述特异性引物对由Acry-Mlt-AS2引物和Mlt-S1N引物组成；

所述Acry-Mlt-AS2引物为下述(a1)或(a2)：

(a1)SEQ ID No.1所示引物；

(a2)将SEQ ID No.1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与SEQID No.1具有相同功能的DNA分子；

所述Mlt-S1N引物为下述(b1)或(b2)：

(b1)SEQ ID No.2所示引物；

(b2)将SEQ ID No.2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与SEQID No.2具有相同功能的DNA分子。

上述的引物对在制备用于区分肝移植供受体细胞的检测试剂盒中的应用。

一种用于区分肝移植供受体细胞的检测试剂盒，所述检测试剂盒含有上述特异性引物对。

一种用于区分肝移植供受体细胞的引物探针组，其中，所述引物探针组由上述引物对及探针组成；所述探针为Probe1s-w、Probe2s-w或Probe4s-w探针；

所述Probe1s-w探针为下述(c1)或(c2)：

(c1)SEQ ID No.3所示探针；

(c2)将SEQ ID No.3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与SEQID No.3具有相同功能的DNA分子；

所述Probe2s-w探针为下述(d1)或(d2)：