[发明专利]卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种卵母细胞体外成熟培养液，其特征在于，由发情母犬血清、发情母犬卵泡液和基础培养液组成；在所述卵母细胞体外成熟培养液中，所述发情母犬血清的体积百分比为48%~52%，所述发情母犬卵泡液的体积百分比为8%~12%，所述基础培养液为M199；所述卵母细胞体外成熟培养液的制备方法包括以下步骤：将所述基础培养液、所述发情母犬血清和所述发情母犬卵泡液混合，得到所述卵母细胞体外成熟培养液；所述发情母犬血清的制备步骤为：将凝固的发情母犬血液于2800r/min~3200r/min离心5min~15min，取上清于50℃~60℃灭活20min~40min；所述发情母犬卵泡液的制备步骤为：从离体的发情母犬的卵巢中抽取卵泡液。

2.一种权利要求1所述的卵母细胞体外成熟培养液在制备犬成熟卵母细胞中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，将犬的卵丘卵母细胞复合体于所述卵母细胞体外成熟培养液中培养70小时~74小时。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述卵丘卵母细胞复合体的培养密度为：每100μL所述卵母细胞体外成熟培养液培养所述卵丘卵母细胞复合体15枚~20枚。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述卵丘卵母细胞复合体为发情母犬的卵丘卵母细胞复合体。