[发明专利]用于指导降血脂用药的SNP位点检测试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种用于指导降血脂用药的SNP位点检测试剂盒，包括扩增PCR反应体系，所述扩增PCR反应体系包括PCR预混液和多对PCR引物，其特征在于，所述PCR引物包括：

rs429358&rs7412上游引物AATCGGAACTGGAGGAACAACT

rs429358&rs74122下游引物TGCTCCTTCACCTCGTCCA

rs4149056上游引物AAAGGAATCTGGGTCATACATG

rs4149056下游引物AGTAGACAAAGGGAAAGTGATC；

本试剂盒能够对APOE(rs429358，rs7412),SLCO1B1(rs4149056)的2个基因的3个SNP位点进行检测。

2.一种用于指导降血脂用药的SNP位点检测试剂盒的使用方法，按照先后顺序包括以下步骤：

(1)采用经典的基因组DNA提取方法或是基因组提取试剂盒，从样本中提取基因组DNA备用；

(2)每管取荧光PCR检测混合液与Taq酶，振荡混匀，获得荧光PCR检测混合液与Taq酶的共混液；

(3)将待测DNA样品、ddH₂O、多对上游引物REP1、多对下游引物REP2加入装有共混液的PCR管中，盖好管盖，组成PCR反应体系；

(4)对步骤(3)的PCR反应体系进行PCR扩增；

(5)对多重扩增产物纯化后送一代测序，同时对APOE(rs429358，rs7412),SLCO1B1(rs4149056)的2个基因的3个SNP位点进行检测；

(6)根据检测结果指导患者降血脂用药。

3.根据权利要求2所述的用于指导降血脂用药的SNP位点检测试剂盒的使用方法，其特征在于，步骤(3)中，所述PCR反应体系的成分组成，包括：共混液10ul，上游引物REP11ul，下游引物REP21ul，基因组DNA10-50ng，ddH₂O补足20ul。

4.根据权利要求2所述的用于指导降血脂用药的SNP位点检测试剂盒的使用方法，其特征在于，步骤(4)中，PCR扩增的条件为：S1:95℃预变性15min，S2：95℃变性10s，S3：60℃退火60s，S4：72℃延伸20s，S5：72℃延伸10min，S6：冷却至4℃，其中S2-S4循环35次。

5.根据权利要求2所述的用于指导降血脂用药的SNP位点检测试剂盒的使用方法，其特征在于，指导使用的糖尿病药为他汀类药物。