[发明专利]通用型CAR-T细胞、其制备及应用

权利要求书

1.一种CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞表达嵌合抗原受体和能下调细胞表面HLA-I类分子表达的功能蛋白；优选地，表达所述嵌合抗原受体和功能蛋白的所述CAR-T细胞细胞表面HLA-I类分子的表达水平为表达相同嵌合抗原受体但未表达所述功能蛋白的对照CAR-T细胞的50％以下。

2.如权利要求1所述的CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞含有所述嵌合抗原受体的编码序列和所述功能蛋白的编码序列；优选地，所述CAR-T细胞含有所述嵌合抗原受体的表达框和所述功能蛋白的表达框，或所述嵌合抗原受体的编码序列和所述功能蛋白的编码序列处于同一表达框内。

3.如权利要求1或2所述的CAR-T细胞，其特征在于，

所述嵌合抗原受体特异性结合选自以下的肿瘤抗原中的一种或多种：EGFRvIII、间皮素、GD2、Tn抗原、sTn抗原、Tn-O-糖肽、sTn-O-糖肽、PSMA、CD97、TAG72、CD44v6、CEA、EPCAM、KIT、IL-13Ra2、leguman、GD3、CD171、IL-11Ra、PSCA、MAD-CT-1、MAD-CT-2、VEGFR2、LewisY、CD24、PDGFR-β、SSEA-4、叶酸受体α、ERBB、Her2/neu、MUC1、EGFR、NCAM、肝配蛋白B2、CAIX、LMP2、sLe、HMWMAA、o-乙酰基-GD2、叶酸受体β、TEM1/CD248、TEM7R、FAP、豆荚蛋白、HPV E6或E7、ML-IAP、CLDN6、TSHR、GPRC5D、ALK、聚唾液酸、Fos-相关抗原、中性粒细胞弹性蛋白酶、TRP-2、CYP1B1、精子蛋白17、β人绒毛膜促性腺激素、AFP、甲状腺球蛋白、PLAC1、globoH、RAGE1、MN-CA IX、人端粒酶逆转录酶、肠羧基酯酶、muthsp 70-2、NA-17、NY-BR-1、UPK2、HAVCR1、ADRB3、PANX3、NY-ESO-1、GPR20、Ly6k、OR51E2、TARP、GFRα4和呈递在MHC上的这些抗原中任一者的多肽片段，以及CD5、CD10、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、CD24、CD25、CD27、CD30、CD34、CD37、CD38、CD40、CD53、CD69、CD72、CD73、CD74、CD75、CD77、CD79a、CD79b、CD80、CD81、CD82、CD83、CD84、CD85、CD86、CD123、CD135、CD138、CD179、CD269、Flt3、ROR1、BCMA、FcRn5、FcRn2、CS-1、CXCR4、CXCR5、CXCR7、IL-7/3R、IL7/4/3R和IL4R；或

所述能下调细胞表面HLA-I类分子表达的功能蛋白选自：HSV、BHV-1、EHV-1/4、PRV、HSV-1/2、VZV、EBV、hCMV、mCMV、RhCMV、HHV-6/7、KSHV、MHV-68、牛痘病毒和腺病毒中能直接靶向降解HLA-I的功能蛋白、能经由TAP蛋白来下调HLA-I类分子表达的功能蛋白和能经由溶酶体来下调HLA-I类分子表达的功能蛋白；优选地，所述功能蛋白选自：来自HCMV的蛋白US11和US6、来自BHV-1的蛋白UL49.5、来自EHV-1的蛋白UL49.5和来自KSHV的蛋白k5。

4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子选自：

(1)含嵌合抗原受体的编码序列和能下调细胞表面HLA-I类分子表达的功能蛋白的编码序列的核酸分子；和

(2)(1)所述核酸分子的互补序列；

优选地，所述嵌合抗原受体和所述功能蛋白如权利要求3所述。

5.一种核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物含有权利要求4所述的核酸分子。

6.如权利要求5所述的核酸构建物，其特征在于，

所述核酸构建物含有所述嵌合抗原受体的表达框和所述功能蛋白的表达框；或所述核酸构建物为一表达框，其中所述嵌合抗原受体的编码序列和所述功能蛋白的编码序列处于该表达框内；或

所述核酸构建物是克隆载体或表达载体。