[发明专利]一种低含量一元酸杂质的长链二元酸及其生产方法有效
| 申请号： | 201910321614.2 | 申请日： | 2019-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN110684784B | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 刘文波;徐敏;杨晨;周豪宏;刘修才 | 申请（专利权）人： | 上海凯赛生物技术股份有限公司;CIBT美国公司 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N1/19;C12P7/6409;C12N15/65;C12N15/90;C12R1/72;C12R1/74 |
| 代理公司： | 北京永新同创知识产权代理有限公司 11376 | 代理人： | 王子楠;栾星明 |
| 地址： | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 含量 一元 杂质 二元酸 及其 生产 方法 | ||
1.一种CYP52A12基因的启动子，其中所述启动子的序列如SEQ ID NO：16和27-36任一所示。
2.一种分离的突变的CYP52A12基因，其中所述突变的CYP52A12基因的序列包含权利要求1的启动子并且由选自SEQ ID NO：22-26任一的序列组成。
3.一种含有权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的突变的CYP52A12基因的微生物，与未含有所述DNA分子或含有未突变的CYP52A12基因微生物相比，其生产的长链二元酸具有降低的一元酸杂质含量，其中所述微生物选自热带假丝酵母(Candida tropicalis)或清酒假丝酵母(Candida sake)。
4.一种利用权利要求3所述的微生物发酵产生长链二元酸的方法，包括培养所述微生物的步骤。
5.权利要求4所述的方法，还包括从培养产物分离、提取和/或纯化长链二元酸的步骤。
6.权利要求4所述的方法，其特征在于，所述微生物发酵产生长链二元酸的过程中，发酵结束后的发酵液中含有一元酸杂质，且所述一元酸杂质的质量比率在5％以下，所述质量比率为发酵液中一元酸杂质占长链二元酸的质量百分比。
7.权利要求4所述的方法，其特征在于，所述微生物发酵产生长链二元酸的过程结束后的发酵液中含有一元酸杂质，且所述一元酸杂质的含量相对于采用常规微生物发酵法生产的一元酸杂质的含量至少下降5％；其中常规微生物发酵法是采用非突变的所述微生物发酵法。
8.权利要求4所述的方法，所述微生物发酵产生的长链二元酸含有一元酸杂质，其特征在于，所述一元酸杂质的含量大于0，且在12000ppm以下，其中所述一元酸杂质包括长链一元羧酸杂质，即在羧酸分子中只含有一个羧基(-COOH)。
9.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质的含量在10000ppm以下。
10.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质的含量在6000ppm以下。
11.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质的含量在3000ppm以下。
12.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质的含量在1000ppm以下。
13.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质的含量在500ppm以下。
14.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质的含量在200ppm以下。
15.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质的化学式包括CH3-(CH2)n-COOH，其中n≥7，和/或，CH2OH-(CH2)n-COOH，其中n≥7。
16.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质包括但不限于碳链上碳原子数在9以上的长链一元酸。
17.权利要求8所述的方法，其中所述一元酸杂质包括九碳一元酸、十碳一元酸、十一碳一元酸、十二碳一元酸、十三碳一元酸、十四碳一元酸、十五碳一元酸、十六碳一元酸、十七碳一元酸、十八碳一元酸、或十九碳一元酸中的任意一种或多种。
18.权利要求8所述的方法，其中，当所述长链二元酸为十碳二元酸时，一元酸杂质为十碳一元酸杂质且所述十碳一元酸杂质的含量低于2500ppm。
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