[发明专利]一种靶向载药颗粒及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向载药颗粒，其特征在于，包括活性药用成分，所述活性药用成分被包裹于腔体中，所述腔体外表面具有亲水性，内表面具有疏水性；

所述活性药用成分微溶、难溶或不溶于水；

所述腔体被包裹于蛋白纳米笼内，所述蛋白纳米笼含有所述活性药用成分对应治疗部位的靶向肽；

所述活性药用成分为槲皮素；

所述腔体由天然环糊精或改性环糊精形成；

所述蛋白纳米笼包括以下蛋白片段：靶向肽RGD、蛋白纳米笼载体和连接肽；

所述蛋白纳米笼含有乙肝病毒核心区域，所述乙肝病毒核心区域中插入靶向肽，所述靶向肽的两端通过连接肽与乙肝病毒核心区域连接；

所述靶向肽位于乙肝病毒核心蛋白颗粒的第72-92位氨基酸之间的任意位置；

所述蛋白纳米笼的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的靶向载药颗粒，其特征在于，所述蛋白纳米笼的粒径范围为30-40nm。

3.根据权利要求1所述的靶向载药颗粒，其特征在于，所述改性环糊精通过化学修饰后具有良好的水溶性以及带负电。

4.根据权利要求1所述的靶向载药颗粒，其特征在于，所述改性环糊精选自磺丁基醚-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精和羧甲基-β-环糊精任一种或多种。

5.权利要求1-4任一项所述的靶向载药颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

所述活性药用成分与形成所述腔体的材料混合，使得所述材料包裹所述活性药用成分，得到包裹有活性药用成分的腔体；

组成蛋白纳米笼的蛋白以解散的状态存在，与所述包裹有活性药用成分的腔体混合，组成蛋白纳米笼的蛋白包裹所述腔体，形成包裹所述腔体的蛋白纳米笼，即得到所述靶向载药颗粒。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述组成蛋白纳米笼的蛋白采用以下方法制备：

如SEQ ID NO.2所示的核酸序列连接至表达载体，经表达、分离纯化得到。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述表达采用大肠杆菌表达系统进行。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，由大肠杆菌BL21(DE3)完成重组蛋白的表达，得到的蛋白具有水溶性且带有正电荷以及自组装特性。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述大肠杆菌经诱导剂诱导表达重组蛋白。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，利用IPTG诱导蛋白表达，IPTG浓度为0.1～1mM，培养时间为4～16h，培养温度为16～37℃，培养期间摇床转速为120～300r/min。

11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述大肠杆菌表达系统先在LB肉汤培养基中10～37℃培养0.5～4h，然后诱导表达重组蛋白。

12.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述分离纯化前还包括以下步骤：破碎菌体，然后沉淀重组蛋白。

13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述破碎菌体采用超声破碎，参数为：250±10W、50±5Hz，超声持续时间1～10s，间隔1～10s。

14.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，采用10％～50％的饱和硫酸铵溶液对菌体破碎物中的蛋白盐析，透析得到所述重组蛋白。

15.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述分离纯化依次经过离子交换柱色谱和分子排阻色谱处理。