[发明专利]核浆同步染色的染料TB-EMB

说明书

本发明涉及本发明涉及到一种新染料，属医疗领域。本发明以“甲苯胺蓝”和“伊红美蓝”为基础性染料，人工合成出了新化合物“甲苯胺蓝‑伊红”(TB‑EMB)，可以实现细胞核和细胞浆一次性同步染色。

技术领域

本发明涉及到一种新染料，可以实现细胞核和细胞浆一次性同步染色，属医疗领域。

背景技术

病理学诊断学的一个重要部分，是对细胞学样本进行形态诊断。其方法是，取细胞样本，经过固定后，染色，放于显微镜下观察其形态及结构，以此判断形态是否异常，进而对疾病进行诊断。

但细胞是没有颜色的，想要通过肉眼观察，必须将其染色。对于形态学来讲，主要是针对细胞核及细胞浆的比例及形态特征进行观察，一般不需要观察诸如高尔基体、线粒体等微结构。应用于形态学的细胞染色，目前国际上最常采用苏木素-伊红染色方法。苏木素和伊红均为一种染料，苏木素主要针对细胞核染色，伊红主要针对细胞浆染色。当然还有类似巴氏染色、瑞氏-吉木萨染色等很多方法。但无论何种染色，也无论染成何种颜色，细胞形态学对染色的要求是不变的。一方面是要求细胞核和细胞浆要不同颜色，对比越鲜明越好，这样容易观察。另一方面就是要简便，辅助试剂最好是乙醇之类的常用试剂。

为例实现上述目标，尤其是对比鲜明这一要求，目前的染色技术，都是采用细胞核和细胞浆分别染色。之所以分开染色，主要是因为两者的理化性质不同，对于染料的着色基团的性质要求也就不同。如果将细胞核染料和细胞浆染料混在一起，就会出现无法着色，甚至染料之间会凝聚等现象，只能分别配制染色液，分别进行染色。因此，目前还未出现一种可以实现将细胞核和细胞浆一次性同步染色的方法及染料。

很明显，分开染色的方式，操作复杂，效率低，而且需要乙醇、水等辅助试剂进行清洗，以防止两种不同的染料在细胞内部产生染色干扰而影响染色效果。

本发明就是针对分开染色的情况而进行的创新。本发明的目标，就是发明出一种可以一次性对细胞核和细胞浆同步进行染色的方法及染料。

发明内容

发明人凭借多年的病理工作经验，经大量研究和实践，发明了一种新染料，可以一次性将细胞核和细胞浆染成不同颜色。

对于形态学诊断来说，细胞核的是染色重点是DNA。通过观察DNA的染色深浅以及形态分布等情况，来判断细胞变异程度。DNA全称是去氧核糖核酸，为双螺旋结构。由于其双螺旋结构的两条链上的磷酸基向外，所以带负电荷，呈酸性。因此，DNA容易与带正电荷的染料或显色基团结合，进而被染色。

很明显，本发明的染料中，需要有带正电荷的染色基团，最好呈蓝色或蓝紫色，这样可以使广大的读片者不必因颜色问题导致读片习惯被改变太大。

形态学诊断的另一个重点，就是要将细胞浆里的蛋白质进行染色。一般情况下，细胞浆里的蛋白质氨基，与DNA相反，是带正电荷，因此，细胞浆染色需要带负电荷的染色基团。但实际的情况要更复杂一些。因为蛋白质带正电荷还是负电荷，主要取决于细胞处于的液体环境的PH值。如果溶液PH偏碱性，胞浆里的蛋白质就会出现羧基游离增多，就会带负电荷。如果溶液PH值偏酸性，胞浆里的蛋白质就会出现氨基游离增多，就会带正电荷。

以上分析不难看出，细胞核的染色，只能是用带正电荷的显色基团。而细胞浆的染色，则可以通过溶液PH的调节，而采取灵活措施。这也是本发明的主要理论基础。

虽然细胞核的DNA呈酸性，带负电荷，但由于DNA的分子链还有其他的理化特性，因此，并不是所有带有正电荷的显色基团都会与之结合。也就是说，只有少数带正电荷的显色基团才能够对细胞核染色。因此，通过实验筛选出只能对细胞核进行染色而不会对细胞浆进行染色的正电荷染色基团，是本发明的第二个理论基础。