[发明专利]一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法

说明书

一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法，属于体外诊断试剂领域，解决了细菌性阴道病临床诊断检测的问题。该多胺检测试剂包括底物、显色液、缓冲液、辅助试剂；底物为苯酚、亚硝基铁氰化钠、亚硝基铁氰化钾中的一种或多种；显色液包括主成分和溶液，主成分为次氯酸钠或次氯酸钾，溶液为氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液；缓冲液选自磷酸氢二钠‑柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液、磷酸二氢钾‑氢氧化钠缓冲液中的一种或多种；辅助试剂选自还原剂、增色剂、分散剂中的一种或多种。本发明依据化学显色法原理，所需的原料和制备方法简单，与类似产品相比，具有操作简单、灵敏度及特异性均较好、适宜普及等优点。

技术领域

本发明属于体外诊断试剂技术领域，涉及一种多胺检测试剂、多胺检测干化学试纸条及其制备方法。

背景技术

细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis，简称BV)是育龄妇女最常见的阴道感染性疾病，占外阴阴道感染的40～50％，近年来研究发现细菌性阴道病不仅与盆腔炎、阴道炎、泌尿系感染等妇科疾病有关，还可以引起羊膜腔感染、胎膜早破、产褥感染、低出生体重、新生儿感染及新生儿黄疸等导致不良围产结局，因此越来越被人们重视。从病理角度分析，细菌性阴道病主要是由于女性阴道内正常菌群减少，厌氧菌和菌混合生长的临床症状群，临床发病率较高(10～15％)，阴道中正常菌群的大量减少而失调，其主要被厌氧菌群(如加德纳杆菌、拟动弯杆菌等其他厌氧菌)侵蚀所造成，在这侵蚀的过程中会产生组织多胺。

经验认为BV的主要病原菌是阴道加德纳菌(GV)，Amsel标准诊断以及以往报道的革兰染色法、脯氨酸氨基肽酶检测法等的检测原理主要也是针对阴道加德纳菌(GV)的。近年研究认为，除了阴道加德纳菌(GV)感染外，BV尚可因定植于阴道内的厌氧菌过度繁殖和/或支原体、阴道毛滴虫、阴道念珠菌等感染导致菌群失调而引起。对于多种微生物混合感染的BV来说，单一检测某一种细菌或其代谢产物，其局限性是难以避免的。

阴道加德纳菌(GV)在代谢过程中可产生胺类物质，支原体和某些厌氧菌等微生物也可因分解尿素或蛋白质而产生氨。早期Graham等学者通过检查人尿中的三甲胺浓度来诊断疾病，如果检测到人尿中的三甲胺浓度高和氧化三甲胺浓度降低到三甲胺浓度的55％以下，就可诊断病人是患有鱼腥味综合症。而后此方法继续进行改良，可制备成用于检测妇女阴道多胺成分的检测试剂盒。目前医学上使用多胺检测法就是基于经典的胺试验设计而成。BV患者阴道分泌物中的胺类，经提取液抽提，加KOH溶液反应，产物在检测板复式膜上经放大后，可显示颜色变化。临床受试365例患者中，多胺检测法得到阳性结果118例，Amsel标准诊断得到阳性结果107例，二法符合率92.6％，而多胺测试一定程度上提高了BV的阳性检出率。目前尚无新的统一的BV诊断标准，不能确切排除多胺检测法的假阳性可能，但患者的临床资料显示，多胺检测法阳性而Arnsel标准诊断阴性的11例均有不同程度的阴道炎临床症状。分析原因，可能与多胺检测法扩大了BV病原体检测范围有关。另外，发现合并有阴道毛滴虫、阴道念珠菌、淋病奈瑟菌和支原体感染时，多胺检测也有助于BV的辅助诊断，与Amsel标准诊断结果比较，符合率≥90％。

细菌性阴道病的典型临床症状为阴道异常分泌物明显增多，呈稀薄均质状或稀糊状，为灰白色、灰黄色或乳黄色，带有特殊的鱼腥臭味。由于碱性前列腺液可造成胺类释放，故表现为性交时或性交后臭味加重。月经期阴道PH值升高，故经期时或经期后臭味也可加重。患者外阴有不适感，包括不同程度的外阴瘙痒，一般无明显时间性，但在休息状态及心情紧张状态下痒感更加明显。尚有不同程度的外服灼热感，有的患者出现性交痛。极少数患者出现下腹疼痛、性交困难及排尿异常感。阴道粘膜上皮在发病时无明显充血表现。本病常可合并其它阴道性传播疾病，故其临床表现可受到合并症的影响而有所不同。如当合并淋球菌感染时，阴道分泌物可表现为明显脓性状，并可出现尿痛、排尿困难等尿路刺激症状；合并滴虫感染时，可出现泡沫状阴道分泌物，且瘙痒加剧，呈奇痒；合并念珠菌感染时，阴道分泌物可呈现为凝乳状或豆腐渣样。

Amsel法是目前作为诊断BV传统的使用方法，该方法提供了以下四点诊断标准并规定至少三点标准符合，则可诊断为BV：