[发明专利]一种小肽及其应用

权利要求书

1.一种小肽在提高酵母镉抗性中的应用，所述小肽由基因AtPDF2.5密码子编码的氨基酸通过肽链连接得到，所述基因AtPDF2.5的基因序列如SEQ ID NO：1所示，其特征在于，所述应用的操作方法包括如下步骤：将所述小肽的编码基因AtPDF2.5通过PCR法扩增，然后通过同源重组的方法克隆至酵母表达载体PYES2中，得到含有基因AtPDF2.5的目标载体，再通过PEG/醋酸锂法把所述目标载体转化至酵母的镉敏感突变体∆yap1中进行异源过表达，即得到含有所述小肽的镉耐受酵母。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述PCR法扩增采用的引物为Ye-AtPDF2.5，其正向引物如SEQ ID NO：3所示，其反向引物如SEQ ID NO：4所示。

3.一种小肽在提高植物镉抗性和镉积累中的应用，所述小肽由基因AtPDF2.5密码子编码的氨基酸通过肽链连接得到，所述基因AtPDF2.5的基因序列如SEQ ID NO：1所示，其特征在于，所述应用的操作方法包括如下步骤：将所述小肽的编码基因AtPDF2.5通过PCR法扩增，然后通过同源重组的方法克隆至植物表达载体P1300中，得到含有基因AtPDF2.5的目标载体，再将所述目标载体通过热击转化法转入农杆菌中，最终通过花序浸染法转化到植物中进行过表达，即得到含有所述小肽的镉耐受植物。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述PCR法扩增采用的引物为OE-AtPDF2.5，其正向引物如SEQ ID NO：7所示，其反向引物如SEQ ID NO：8所示。

5.一种小肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的第27至73位。

6.一种如权利要求5所述的小肽在提高大肠杆菌镉螯合活性中的应用，其特征在于，所述应用的操作方法包括如下步骤：将所述小肽的编码基因ΔSPAtPDF2.5通过PCR法扩增，所述编码基因ΔSPAtPDF2.5的基因序列如SEQ ID NO：1的第79位至第222位所示，然后通过同源重组的方法克隆至蛋白表达载体PCold-TF中，得到含有基因ΔSPAtPDF2.5的目标载体，再将所述目标载体通过热击转化法转入大肠杆菌中进行原核表达，即得到具有镉螯合活性的原核表达蛋白。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述PCR法扩增采用的引物为TF-AtPDF2.5，其正向引物如SEQ ID NO：5所示，其反向引物如SEQ ID NO：6所示。