[发明专利]一种异亮氨酸发酵液的提纯工艺

权利要求书

1.一种异亮氨酸发酵液的提纯工艺，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将异亮氨酸发酵液通过陶瓷膜进行一级透析，得到一级透析液和一级浓缩液；

(2)将所述一级透析液通过纳滤膜进行二级透析，得到二级透析液和二级浓缩液；

(3)将所述二级透析液进行连续色谱分离，得到产品液和杂质液；

(4)将所述产品液通过第一反渗透膜进行三级透析，得到三级浓缩液和三级透析液；

(5)将所述三级浓缩液依次进行活性炭脱色、冷冻结晶和干燥，得到异亮氨酸；

所述一级透析、二级透析和三级透析前独立地进行精密过滤，留取滤液进行一级透析、二级透析和三级透析，所述一级透析前的精密过滤的滤孔孔径为1～50μm，所述二级透析和三级透析前的精密过滤的滤孔孔径独立地为1～10μm；

所述一级透析完成后，还包括对所述一级浓缩液进行第一顶洗，所述第一顶洗用水为三级透析液和/或经过第二反渗透膜过滤后的杂质液；所述第一顶洗用水的体积为异亮氨酸发酵液的体积的35～45％；

所述二级透析完成后，还包括对所述二级浓缩液进行第二顶洗，所述第二顶洗用水为三级透析液和/或经过第二反渗透膜过滤后的杂质液；所述第二顶洗用水的体积为一级透析液的10～20％；

所述连续色谱分离的系统包括洗脱区、延长分离区、主分离区和后分离区，其中洗脱区包括3根树脂柱，延长分离区包括2根树脂柱，主分离区包括3根树脂柱，后分离区包括2根树脂柱，各功能区的树脂柱采用串联的方式连接，各功能区设置有相应的物料泵将物料泵入相应的功能区，各功能区排放出的物料进入中转罐，上述四个功能区组成一个环状循环体系，并处于不断旋转循环的状态；在运行过程中，料液由泵泵入主分离区，含杂质的液体进入杂质缓存罐，异亮氨酸逐渐富集在树脂柱上，进料的料液逐渐被消耗，由泵把新料打入进料罐，维持进料罐液位稳定；将杂质缓存罐中储存的含杂质液体泵入后分离区，水会先进入回用水收集罐，色素、盐分杂质逐渐富集在树脂柱上，最终返回杂质缓存罐，由泵把杂质缓存罐中的一部分含杂质液体泵入杂质收集罐，为杂质液；异亮氨酸产品缓存液泵入延长分离区，主分离区的部分树脂柱步入此分离区，产品缓存罐中部分缓存液进入树脂柱，使异亮氨酸进一步富集在树脂柱中，主分离区中未完全分离的少部分杂质则进入进料缓存罐，产品缓存罐部分产品由泵打入产品收集罐，得到产品液；纯水泵入洗脱区，主分离区和延长分离区中的树脂柱步入此区域，此区域的树脂柱内大部分为异亮氨酸产品，用纯水以一定流速洗脱即可得到异亮氨酸产品，洗脱完毕的树脂柱则循环进入后分离区部分。

2.如权利要求1所述一种异亮氨酸发酵液的提纯工艺，其特征在于，所述陶瓷膜的截留分子量为45～55KD；所述一级透析的压力为3～4bar，温度为40～60℃。

3.如权利要求1所述一种异亮氨酸发酵液的提纯工艺，其特征在于，所述纳滤膜的截留分子量为450～550Da；所述二级透析的压力为10～18bar，温度为48～55℃。

4.如权利要求1所述一种异亮氨酸发酵液的提纯工艺，其特征在于，所述第一反渗透膜对氯化钠的截留率≥96％；所述三级透析的压力为12～16bar，温度为40～52℃。

5.如权利要求1所述一种异亮氨酸发酵液的提纯工艺，其特征在于，所述一级透析、二级透析和三级透析的方式为错流透析。