[发明专利]一种大米抗性淀粉的绿色制备方法

权利要求书

1.一种大米抗性淀粉的绿色制备方法，以大米淀粉为底物，其特征在于：在低于糊化温度下，依次用来自大麦的β-淀粉酶、来自黑曲霉的葡萄糖苷转移酶和来自长野解普鲁兰杆菌的普鲁兰酶修饰淀粉的链结构，得到若干短线性链，这些短线性链在4℃下有效排列、聚集、重结晶形成高抗性淀粉含量的大米变性淀粉。

2.根据权利要求1所述的大米抗性淀粉的绿色制备方法，其特征为，包括如下步骤：（1）将大米淀粉配制成重量体积分数为10%的悬浮液并调节悬浮液pH为5.0；（2）向悬浮液中加入β-淀粉酶，于恒温水浴中振荡水解，然后灭酶活性，调节酶解液pH为5.0；（3）向酶解液中加入葡萄糖苷转移酶，于恒温水浴中振荡酶解，然后灭酶活性，调节酶解液的pH值为5.0；（4）向酶解液中加入普鲁兰酶，于恒温水浴中振荡酶解，然后灭酶活性，最后将酶解液pH值调为中性；（5）将酶解液加入无水乙醇中，静置；（6）离心收集沉淀物，所得沉淀经冷冻、干燥，得到产品。

3.根据权利要求2所述的大米抗性淀粉的绿色制备方法，其特征在：步骤（1）中，称取20g大米淀粉，将其悬浮于200mL的pH为5.0的0.02mol/L乙酸钠缓冲溶液中，置于50℃水浴中稳定0.5小时，得到悬浮液。

4.根据权利要求2所述的大米抗性淀粉的绿色制备方法，其特征在于：步骤（2）中，向悬浮液中加入1300-1600U/g的β-淀粉酶，置于50℃水浴中振荡2小时，然后加入3mL1mol/L的氢氧化钠溶液灭酶以终止反应，再用等体积浓度的盐酸溶液将酶解液的pH值调回5.0。

5.根据权利要求2所述的大米抗性淀粉的绿色制备方法，其特征在于：步骤（3）中，向酶解液中加入1600-1800U/g的葡萄糖苷转移酶，置于50℃水浴中振荡4-12小时，然后加入3mL1mol/L的氢氧化钠溶液灭酶以终止反应，再用等体积浓度的盐酸溶液将酶解液的pH值调回5.0。

6.根据权利要求2所述的大米抗性淀粉的绿色制备方法，其特征在于：步骤（4）中，向酶解液中加入20-40U/g的普鲁兰酶，置于55℃水浴中振荡12小时，然后加入3mL1mol/L的氢氧化钠溶液灭酶以终止反应，再用等浓度的盐酸溶液将酶解液的pH值调回7.0。

7.根据权利要求2所述的大米抗性淀粉的绿色制备方法，其特征在于：步骤（5）中，在连续搅拌的条件下，将步骤（4）所得的酶解液缓慢导入三倍体积的无水乙醇中，之后将混合物于4℃下静置12h。

8.根据权利要求2所述的大米抗性淀粉的绿色制备方法，其特征在于：步骤（6）中，将静置后的混合物以5000rpm的速度离心15min，收集沉淀物，然后用质量浓度90%的乙醇溶液洗涤三次，最后，将沉淀物冷冻干燥。