[发明专利]一种循环游离DNA和血细胞保存介质

说明书

本发明涉及一种循环游离DNA和血细胞保存介质，所述保存介质含有以下组分：1)一种或多种保护剂；2)一种或多种螯合稳定剂；3)一种或多种代谢抑制剂；4)一种或多种酶抑制剂；5)一种或多种防吸附剂；6)缓冲液。本发明对循环游离DNA和细胞保护效果明显，可以在常温下长期保存血液制剂或生物样品，该保存介质体系不含游离醛类物质，降低了人体接触添加有本保存介质的液体样品、生物样品时的过敏反应、毒性反应，降低了保存介质潜在的致癌风险，有利于保持产品制剂、生物样品中的核酸的完整性，确保核酸类物质检测的准确性、科学性，给出更接近于真实的检测结果。

技术领域

本发明公开了一种保存介质，具体为一种循环游离DNA和血细胞保存介质，属于生物制剂技术领域。

背景技术

血液因其取样方便、操作简单，是目前生命科学研究和临床诊断中应用最广的样本，并且血液制品也广泛应用于临床。传统的抗凝管如EDTA抗凝管、肝素抗凝管等具有保存血样的作用，但保存时间较短，即使在4℃的环境下保存12小时，细胞活性丢失达30-40％之多，使得样本在一些要求更为苛刻的实验中无法满足要求。

液态活检作为体外诊断的一个分支，以循环肿瘤细胞(circulating tumor cell，CTC)检测、循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA，ctDNA)检测、外泌体及循环RNA(Circulating RNA)检测是检测肿瘤、辅助治疗的突破性技术，同时也是生殖健康领域的无创产前诊断的突破性技术。液态活检包括循环游离DNA循环游离DNA(cell free DNA，cfDNA)和CTC。目前市场上虽有相应保存血液样本的产品，但其功能具有单一性，无法同时满足cfDNA、CTC或血细胞功能检测，并且保存效果随时间增加下降严重。如强生cellsave细胞保存管、罗氏cell free DNA collection tube血浆游离DNA保存管。两种产品在不同程度上满足使用者要求，但因其高昂的价格，功能单一性使得使用者承担高额费用的同时无法得到更好的效果。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明公开了一种循环游离DNA和血细胞保存介质。

本发明所采用的技术方案如下：

一种循环游离DNA和血细胞保存介质，所述保存介质含有以下组分：

1)一种或多种保护剂；

2)一种或多种螯合稳定剂；

3)一种或多种代谢抑制剂；

4)一种或多种酶抑制剂；

5)一种或多种防吸附剂；

6)缓冲液。

优选的：

所述保护剂选自已内酰脲、噁唑烷酮类、重氮烷基脲、咪唑烷基脲、羟甲基甘氨酸钠中的一种或多种；

所述螯合稳定剂选自乙二胺四乙酸盐、草酸盐、枸橼酸盐中的一种或多种；

所述代谢抑制剂选自甘露聚糖、衣霉素、金精三羧酸、苦豆碱中的一种或多种；

所述酶抑制剂选自氟化钠或者甘油醛；

所述防吸附剂选自聚乙烯醇、甜菜碱、海藻糖中的一种或多种；

所述缓冲液为甘氨酸-磷酸缓冲液；

保存介质的pH值范围为3.0～8.0。

优选的，保护剂与代谢抑制剂的摩尔比为1:0.5～1:5.0。更为优选的是，保护剂与代谢抑制剂的摩尔比为1:1。

优选的，保护剂与酶抑制剂的摩尔比为1:0.5～1:4.0。更为优选的是，保护剂与酶抑制剂的摩尔比为1:1。