[发明专利]ACE插入突变型探针、ACE缺失突变型探针、试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201910298977.9 | 申请日： | 2019-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN110129427A | 公开（公告）日： | 2019-08-16 |
| 发明（设计）人： | 张小蒙;周敏 | 申请（专利权）人： | 江苏医药职业学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人： | 高爽 |
| 地址： | 224008 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 插入突变 探针 内含子 基因工程技术 分子生物学 核苷酸序列 缺失突变型 试剂盒 可用 筛查 检测 应用 | ||
1.一种ACE插入突变型探针，其特征在于，所述ACE插入突变型探针特异性地识别第16内含子发生插入突变的ACE基因；
所述ACE插入突变型探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述SEQ ID NO:3为5'-CCAAACTTCACAGTCTCT-3'。
2.根据权利要求1所述的ACE插入突变型探针，其特征在于，所述ACE插入突变型探针的5'端和/或3'端具有荧光标记。
3.一种ACE缺失突变型探针，其特征在于，所述ACE缺失突变型探针特异性地识别第16内含子发生缺失突变的ACE基因；
所述ACE缺失突变型探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述SEQ ID NO:4为5'-AACATTCTCATCCACGC-3'。
4.根据权利要求3所述的ACE缺失突变型探针，其特征在于，所述ACE缺失突变型探针的5'端和/或3'端具有荧光标记。
5.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
引物；
权利要求1或2所述的ACE插入突变型探针；以及
权利要求3或4所述的ACE缺失突变型探针；
其中，所述引物特异性地扩增ACE基因，所述引物包括正向引物和反向引物；
所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，SEQ ID NO:1为5'-AGATGTAGGGTATGCAGTTTCTGC-3'；
所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，SEQ ID NO:2为5'-CCAGAGATTGATTGATGAGAGCG-3'。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照品，所述阳性对照品包括与权利要求1或2所述的ACE插入突变型探针特异性结合的ACE基因片段、以及与权利要求3或4所述的ACE缺失突变型探针特异性结合的ACE基因片段。
7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照品，所述阳性对照品包括ACE基因位点插入突变型质粒、以及ACE基因位点缺失突变型质粒；
所述ACE基因位点插入突变型质粒具有与权利要求1所述的ACE插入突变型探针特异性结合的ACE基因片段；
所述ACE基因位点缺失突变型质粒具有与权利要求3所述的ACE缺失突变型探针特异性结合的ACE基因片段。
8.根据权利要求5-7中任意一项所述的检测ACE基因型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括以下组分中的至少一种：
阴性对照品；
缓冲液；
dNTP；
DNA聚合酶；以及
灭菌水。
9.权利要求1或2所述的ACE插入突变型探针、权利要求3或4所述的ACE缺失突变型探针、以及权利要求5-8中任意一项所述的试剂盒中的至少一种在制备检测和/或筛查ACE基因型的制剂中的应用。
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