[发明专利]一种提取杜仲含胶细胞的方法

说明书

本发明公开了一种提取杜仲含胶细胞的方法。方法包括：新鲜杜仲叶经预处理、变性处理、整体透明处理和含胶细胞解离，提取杜仲含胶细胞。所述预处理包括：新鲜杜仲叶放入烘箱中进行杀青处理，并中低温下烘干至重量不变。本发明通过对新鲜杜仲叶片的预处理，改善其工艺条件，大大缩短了从杜仲叶中提取杜仲含胶细胞这一实验工艺的工艺时长，有效解决了杜仲含胶细胞在实验过程中容易破坏的问题，提高了提取效率。

技术领域

本发明涉及杜仲胶技术领域，进一步地说，是涉及一种提取杜仲含胶细胞的方法。

背景技术

对于杜仲含胶细胞提取方式的研究，目前相关文献报道较少，最近的相关文献报道采用的是新鲜的杜仲植株，将其洗净沥水，剪成小段，未用固定液固定而直接采用变性试剂处理40-60小时，通过变性处理后，再经高浓度氢氧化钠水溶液并配合水浴加热进行整体透明处理约20-40小时，之后将样品过滤，流水冲洗，并用果胶酶水溶液在室温下进行离析作用45-65小时直至将杜仲含胶细胞分离出来。该技术工艺主要存在以下不足：

(1)该技术工艺反应时间过长即在实验过程中含胶细胞需要长时间与具有强氧化性的化学试剂反应，极易导致含胶细胞细胞壁破裂溶解，使得胶体流出溶解，进而影响杜仲含胶细胞的提取率。

(2)未经预处理的新鲜植株在变性反应阶段难以与化学试剂充分反反应，导致褪色不彻底，进而影响后续反应，不利于杜仲含胶细胞的提取甚至使得该实验失败。

目前所存在的杜仲含胶细胞的提取方法存在着化学污染大，提取效率不高，提取物杜仲含胶细胞纯度过低等一系列不足。

发明内容

为解决现有技术工艺时间过长，提取效率低下且提取率不高的问题。本发明提供了一种提取杜仲含胶细胞的方法。着重解决了在反应过程中尤其第一阶段即变性处理阶段，杜仲叶褪色不彻底的问题。本发明通过对新鲜杜仲叶片的预处理，改善其工艺条件，大大缩短了从杜仲叶中提取杜仲含胶细胞这一实验工艺的工艺时长，有效解决了杜仲含胶细胞在实验过程中容易破坏的问题，提高了提取效率。

本发明的目的之一是提供一种提取杜仲含胶细胞的方法。

包括：

新鲜杜仲叶经预处理、变性处理、整体透明处理和含胶细胞解离，提取杜仲含胶细胞。

其中，

所述预处理包括：新鲜杜仲叶放入烘箱中进行杀青处理，并中低温下烘干至重量不变。

杀青处理时，烘箱温度为100℃～130℃，杀青处理时间10-20分钟；然后将温度调至55℃～65℃，烘至重量不变。

所述变性处理包括：经预处理的杜仲干叶片加入到变性试剂中，搅拌使其混合均匀，密封避光保存40～50小时；

杜仲干叶片的体积为变性试剂体积的三十分之一到二十分之一。

所述整体透明处理包括：

将变性处理后的杜仲干叶片过滤，取其滤渣，并用去离子水反复冲洗干净，将过滤后的叶片加入氢氧化钠溶液中，搅拌，使得叶片完全浸入到溶液中，之后放入水浴锅中，50～65℃加热反应10～20小时。

去离子水冲洗的流速为1.5米/秒～3米/秒；

氢氧化钠溶液的质量浓度为5％～20％。

所述含胶细胞的解离包括：

将经过整体透明后的杜仲干叶片过滤，用去离子水反复冲洗滤渣，然后将滤渣放入果胶酶溶液中，35℃～55℃水浴加热30～40小时。

去离子水冲洗流速为1.5米/秒～3米/秒；

果胶酶溶液的质量浓度范围为2％～5％。