[发明专利]细胞保存液及其制备方法和其在流式和抗体测试中的应用有效
申请号: | 201910284202.6 | 申请日: | 2019-04-10 |
公开(公告)号: | CN109997842B | 公开(公告)日: | 2021-08-13 |
发明(设计)人: | 韩宇;王皓;杨晓冬;李顺;刘凯;张洁;秦仲铮 | 申请(专利权)人: | 天津中科生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02;G01N33/531 |
代理公司: | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人: | 韩蕾;姚亮 |
地址: | 300000 天津市中新天津生态城*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 保存 及其 制备 方法 抗体 测试 中的 应用 | ||
1.一种细胞保存液组合物,其由Na2HPO4、NaH2PO4、NaCl、KCl、封闭剂及防腐抗菌剂组成;
所述封闭剂为牛血清白蛋白BSA;
所述防腐抗菌剂为ProClin300和NaN3;
其中,Na2HPO4、NaH2PO4、NaCl、KCl的用量比例为:
Na2HPO4 0.035~0.045 mol
NaH2PO4 0.028~0.032 mol
NaCl 0.148~0.153 mol
KCl 1.0~1.1 mmol。
2.一种细胞保存液,其是由权利要求1所述的组合物与水配制而成的,其pH值为7.0~7.4。
3.根据权利要求2所述的细胞保存液,其中具有以下组分及含量:
Na2HPO4 0.035~0.045 mol/L;
NaH2PO4 0.028~0.032 mol/L;
NaCl 0.148~0.153 mol/L;
KCl 1.0~1.1 mmol/L;
封闭剂的含量m/v为5%;
ProClin300的含量v/v为0.5‰,NaN3的含量m/v为1‰。
4.权利要求2或3所述的细胞保存液的制备方法,其包括将Na2HPO4、NaH2PO4、NaCl、KCl、封闭剂、防腐抗菌剂与水混合的步骤。
5.根据权利要求4所述的制备方法,所述制备方法还包括对混合后的液体进行过滤和/或分装的步骤。
6.权利要求1所述的细胞保存液组合物或权利要求2或3所述的细胞保存液在保存细胞中的应用;
其中,所述细胞为肿瘤细胞;
所保存的细胞是用于流式抗体测试实验;
所述的细胞保存液是与含有细胞的样本液中的细胞沉淀混合,在2~8℃条件下保存。
7.以权利要求2或3所述的细胞保存液保存细胞而得到的保存产物。
8.权利要求7所述的保存产物在流式抗体测试实验中的应用,其中,所述流式抗体测试实验包括:
将所述保存产物等分,PBS混匀,离心,清洗,之后分别与由DAPI核染料和抗EpCAM、抗CK、抗CD45抗体混合,混匀后孵育;
孵育的细胞抗体混合物,加入PBS,混匀后,离心,去上清并重悬;
流式细胞仪和/或荧光显微镜下抗体测试检测细胞悬液。
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