[发明专利]靶向Claudin18.2的CAR分子、其修饰的免疫细胞及用途

权利要求书

1.一种核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体具有如式car-[(IRES)-f]_m所示的结构，其中，IRES为内部核糖体进入位点序列；f编码功能性蛋白F，m为0或非0自然数；car编码CAR且所述CAR包括：(a)特异性识别CLDN18.2的胞外结合结构域scFv；(b)铰链结构域；(c)跨膜结构域；(d)共刺激胞内结构域；(e)信号传导结构域；

其中，所述胞外结合结构域包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区包含至少1个选自以下的互补决定区(CDR)：如SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12氨基酸序列或其突变所示的CDR1；如SEQ ID NO:13氨基酸序列或其突变所示的CDR2；如SEQ ID NO:14氨基酸序列或其突变所示的CDR3；所述重链可变区包含至少1个选自以下的CDR：如SEQ ID NO:15氨基酸序列或其突变所示的CDR1；如SEQ ID NO:16氨基酸序列或其突变所示的CDR2；如SEQ IDNO:17氨基酸序列或其突变所示的CDR3；所述突变保持或改善了所述抗体或抗原结合片段与所述CLDN18.2抗原的结合。

2.如权利要求1所述的核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体中，所述scFv的结构为轻链可变区-连接子-重链可变区或重链可变区-连接子-轻链可变区，所述连接子优选(GGGGS)_n；n优选1至6的整数，更优选3和4。

3.如权利要求1或2所述的核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体中，所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:11氨基酸序列或其突变所示的CDR1、如SEQ ID NO:13氨基酸序列或其突变所示的CDR2，和，如SEQ ID NO:14氨基酸序列或其突变所示的CDR3；或，如SEQ ID NO:12氨基酸序列或其突变所示的CDR1、如SEQ ID NO:13氨基酸序列或其突变所示的CDR2，和，如SEQ ID NO:14氨基酸序列或其突变所示的CDR3；

和/或，所述重链可变区包含如SEQ ID NO:15氨基酸序列或其突变所示的CDR1、如SEQID NO:16氨基酸序列或其突变所示的CDR2，和，如SEQ ID NO:17氨基酸序列或其突变所示的CDR3；

较佳地，所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:11氨基酸序列或其突变所示的CDR1、SEQID NO:13氨基酸序列或其突变所示的CDR2和SEQ ID NO:14氨基酸序列或其突变所示的CDR3；且，所述重链可变区包含如SEQ ID NO:15氨基酸序列或其突变所示的CDR1、如SEQ IDNO:16氨基酸序列或其突变所示的CDR2，和，如SEQ ID NO:17氨基酸序列或其突变所示的CDR3；或，

所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列或其突变的CDR1、如SEQ IDNO:13所示的氨基酸序列或其突变的CDR2，和，如SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列或其突变的CDR3；且，所述重链可变区包含如SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列或其突变的CDR1、如SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列或其突变的CDR2，和，如SEQ ID NO:17所示的氨基酸序列或其突变的CDR3。

4.如权利要求1-3任一项所述的核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体中，所述胞外结合结构域包含如SEQ ID NO:29-33中任一个氨基酸序列或其突变序列所示的轻链可变区；和/或，如SEQ ID NO:34-37中任一个氨基酸序列或其突变序列所示的重链可变区；

优选地，所述胞外结合结构域包含如SEQ ID NO:29的氨基酸序列所示的轻链可变区，如SEQ ID NO:34的氨基酸序列所示的重链可变区；或，如SEQ ID NO:31的氨基酸序列所示的轻链可变区，如SEQ ID NO:34的氨基酸序列所示的重链可变区；如SEQ ID NO:7的氨基酸序列所示的轻链可变区，如SEQ ID NO:8的氨基酸序列所示的重链可变区。