[发明专利]包含趋化因子与结合伴侣的融合多肽及其用途

说明书

本发明涉及生物医药领域。具体的，本发明涉及的分离的多肽，所述分离的多肽包含第一和第二部分，所述第一部分包含趋化因子或其功能性片段，所述第二部分包含能够与抗原特异性结合的结合伴侣。更具体地，所述趋化因子为CCL19。本发明还涉及编码该分离的多肽的核酸分子、包含该核酸分子的载体和包含该载体的宿主细胞。本发明进一步涉及用于产生该分离的多肽的方法。最后，本发明涉及包含该分离的多肽、核酸分子、载体和/或宿主细胞的药物组合物，特别用于杀伤肿瘤细胞以及治疗癌症。

技术领域

本发明涉及生物医药领域。具体的，本发明涉及一种分离的多肽，所述分离的多肽包含第一和第二部分，所述第一部分包含趋化因子或其功能性片段，所述第二部分包含能够与抗原特异性结合的结合伴侣。更具体地，所述趋化因子为CCL19。本发明还涉及编码该分离的多肽的核酸分子、包含该核酸分子的载体和包含该载体的宿主细胞。本发明进一步涉及用于产生该分离的多肽的方法。最后，本发明涉及包含该分离的多肽、核酸分子、载体和/或宿主细胞的药物组合物，特别用于杀伤肿瘤细胞以及治疗癌症。

发明背景

近几十年来，世界范围内肿瘤的发病率和病死率越来越高。虽然针对肿瘤的治疗手段有了很多新的进展，但绝大多数肿瘤患者仍无法获得根治，容易复发和转移，恶性肿瘤患者的生存时间和生活质量始终较低。近年来各种免疫治疗方法以及药物发展迅速，在抗体、免疫调节剂以及细胞治疗等各方面都取得重大进展。例如针对CD20的单克隆抗体、针对CD19、CD33的嵌合抗原受体T淋巴细胞(CAR-T)，在急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗中都展现了巨大的应用前景。但在实体瘤方面，由于肿瘤特异性抗原的缺乏和肿瘤抑制微环境的存在，使得各类疗法的效果均不甚理想。

单克隆抗体是指由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，简称单抗。最早被用于疾病治疗是在1982年，美国斯坦福医学中心Levy等人利用制备的抗独特型单抗治疗B细胞淋巴瘤，治疗后患者病情缓解，瘤体消失。在实体瘤方面，针对HER2+的乳腺癌的曲妥珠单抗(赫赛汀)也在临床广泛应用。但随着使用单抗进行治疗的病例数的增加，药物抗性的问题也越来越明显。一般认为ADCC是抗体发挥杀伤作用的重要机制，单抗通过Fc段与效应细胞表面激活性受体FcYR I/FcYR III结合发挥杀伤作用，但具有免疫杀伤作用的T细胞因为表面缺乏上述受体而不能被有效介导，从而削弱了机体对肿瘤的免疫效应。同时单克隆抗体分子量大，难以穿透肿瘤组织，这些弊端均限制了单抗的应用。因此使抗体小型化的同时，又要使抗体更有效的刺激机体的免疫系统，方能降低耐药性的产生。

肿瘤干细胞(cancer stem cell，CSC)的概念是在长期的研究中逐步发展形成的。肿瘤干细胞是指癌瘤组织中少量存在的具有自我更新能力及分化潜能的细胞，该群细胞属于成体干细胞的范畴且自我更新失控。研究认为肿瘤干细胞是肿瘤形成的起始细胞，可能是肿瘤发生、发展、转移及复发的根源。目前研究表明，肿瘤干细胞存在于包括白血病、乳腺癌、脑肿瘤、结直肠癌及胰腺癌等恶性肿瘤中。而对肝细胞肝癌的研究显示肝细胞癌的发生发展过程中也有肿瘤干细胞的参与。寻找特异性的表面标记物，通过其分选肿瘤干细胞，是进一步研究肿瘤发生、转移、复发和预后的关键。众多研究显示，CD133为肿瘤干细胞表面特异标记分子。人CD133基因位于4号染色体，基因全长约160kb，包含至少约37个外显子。通过细胞表面标记CD133分子，可有效地识别和鉴定多种肿瘤的肿瘤干细胞，从而对肿瘤干细胞的特性进行分析。并且CD133与肿瘤的转移、肿瘤的血管生成都有关系，因而认为CD133可以作为某些肿瘤的预后指标。而对肝癌干细胞的研究表明CD133抗原是肝癌干细胞的表面标记物。

本领域需要可以打破肿瘤的免疫抑制微环境，募集机体免疫细胞浸润到肿瘤组织内的活性表达产物并进一步提高抗肿瘤作用的构建体。

发明内容

在第一方面，本发明提供一种分离的多肽，所述多肽包含第一和第二部分，所述第一部分包含趋化因子或其功能性片段，所述第二部分包含能够与抗原特异性结合的结合伴侣。

在第二方面，本发明提供一种分离的多核苷酸，其编码本发明的多肽。