[发明专利]桂枝芍药知母汤的检测方法

权利要求书

1.一种桂枝芍药知母汤的检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：

1）参照物溶液的制备：取没食子酸、芒果苷、芍药苷、升麻素苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸和甘草酸铵对照品，分别加甲醇溶解，作为参照物溶液；

2）供试品溶液的制备：取待测样品，加50%甲醇溶液溶解，即得供试品溶液；

3）分别吸取参照物溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以0.1%甲酸水为流动相A，以0.1%甲酸乙腈为流动相B梯度洗脱；检测波长为254nm；柱温为32℃；流动相流速1mL/min；梯度洗脱程序如下：

。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2）所述待测样品为桂枝芍药知母汤或桂枝芍药知母汤冻干粉；所述待测样品与50%甲醇溶液的质量体积比为0.02-0.05g:1ml。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述待测样品与50%甲醇溶液的质量体积比为0.02g:1ml。

4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述桂枝芍药知母汤冻干粉制备方法如下：

取桂枝芍药知母汤原方饮片，加水浸泡，煎煮，过滤，滤液冷却后定容，冷冻干燥，得桂枝芍药知母汤物质基准，取桂枝芍药知母汤物质基准加水溶解，再加乙醇溶液沉淀，取上清液真空冷冻干燥，制得桂枝芍药知母汤冻干粉。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述饮片与水的质量体积比为93g：1400ml；所述浸泡30min；所述煎煮是武火煮沸，文火微沸55min；所述过滤是用200目纱布双层过滤；所述定容至饮片的4.3倍量v/w，ml/g。

6.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述桂枝芍药知母汤物质基准与水的质量体积比为4g：50ml；所述乙醇为95-100%乙醇；所述加乙醇溶液至溶液醇浓度为75%；所述沉淀时间为24-30h。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述乙醇为95%乙醇；所述沉淀时间为24h。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤3）所述注入液相色谱仪的溶液体积为10～20μl；所述色谱柱规格为4.6×250mm，5μm。

9.据权利要求8所述的检测方法，其特征在于：步骤3）所述注入液相色谱仪的溶液体积为20μl。

10. 根据权利要求1~9任意一项所述的检测方法，其特征在于：所述检测方法得到的特征图谱中应呈现26个特征峰，其中8个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同，与芒果苷参照物相应的峰为S峰，与没食子酸参照物相应的峰为峰4，与芍药苷参照物相应的峰为峰14，与升麻素苷参照物相应的峰为峰15，与甘草苷参照物相应的峰为峰17，与5-O-甲基维斯阿米醇苷参照物相应的峰为峰19，与肉桂酸参照物相应的峰为峰23，与甘草酸铵参照物相应的峰为峰25，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±3％之内；规定值为：峰1：0.123、峰2：0.233、峰3：0.338、峰4：0.347、峰5：0.36、峰6：0.538、峰7：0.565、峰8：0.649、峰9：0.676、峰10：0.752、峰11：0.899、峰12 S峰：1、峰13：1.029、峰14：1.068、峰15：1.102、峰16：1.204、峰17：1.231、峰18：1.24、峰19：1.292、峰20：1.302、峰21：1.4、峰22：1.444、峰23：1.512、峰24：1.662、峰25：1.732、峰26：1.781。