[发明专利]一种碱降解液有效

专利信息
申请号: 201910259119.3 申请日: 2019-04-02
公开(公告)号: CN109762860B 公开(公告)日: 2021-10-01
发明(设计)人: 袁建栋;刘会明 申请(专利权)人: 博瑞生物医药泰兴市有限公司
主分类号: C12P21/02 分类号: C12P21/02;C07K9/00;C12R1/01
代理公司: 苏州锦尚知识产权代理事务所(普通合伙) 32502 代理人: 滕锦林
地址: 225400 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 降解
【权利要求书】:

1.一种用于发酵制备奥利万星中间体A82846B的碱降解液,其特征在于该碱降解液由如下方法制备:

(1)将东方拟无枝酸菌接种到种子培养基中进行培养,得到种子液;

(2)将种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养;

(3)对发酵得到的发酵液进行提取,提取得到的A82846B纯度在90%以上部分用于提取产品,纯度在90%以下的则是杂质废液;

(4)将上述杂质废液进行碱降解;其中,

步骤(1)所述的东方拟无枝酸菌为东方拟无枝酸菌NRRL 18099;

步骤(1)所述的种子培养基为麦芽糊精20g/L,葡萄糖10g/L,黄豆粉15g/L,酵母提取物3g/L,碳酸钙1g/L,pH7.0;

步骤(2)所述的发酵培养基为麦芽糊精40g/L,糖蜜20g/L,黄豆粉20g/L,酵母粉10g/L,碳酸钙3g/L,氯化钙10g/L,pH7.0;

步骤(3)所述的提取的方法为:将步骤(2)得到的发酵培养液pH调节至10.3,搅拌后进行板框压滤,得到压滤液,将压滤液调节pH=9.2,将其导入LX18吸附树脂,树脂用水净化后,再用1.0%醋酸水溶液进行解吸,并将浓度大于500mg/L的组分混合,组成一次解吸混合液,然后将解吸混合液进行纳滤,浓缩至单位为35000mg/L,将浓缩液导入已平衡好的C18柱,用洗脱液进行洗脱,该洗脱液为按体积计5%乙腈:0.5%NH4H2PO4=3:97,收集纯度为90%以上的组分用于提取产品;

步骤(4)所述的碱降解是步骤(3)得到的杂质废液在pH不小于11.5的环境下进行水解的,取步骤(3)得到的杂质废液,50-60℃水浴,水浴10h后开始取样液相分析,当A82846A、A82846B和A82846C完全检测不到的时候,停止水浴,杂质降解液冷却后,调节pH至中性,得到的为碱降解液。

2.如权利要求1所述的碱降解液,其特征在于制备其方法的步骤(4)所述的碱降解是步骤(3)得到的杂质废液在pH为11.5~12.5的环境下进行水解的。

3.如权利要求2所述的碱降解液,其特征在于制备其方法的步骤(4)所述的碱降解为:取步骤(3)得到的杂质废液,调节pH至11.5。

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