[发明专利]天然产物在激活斑点叉尾鮰核受体AHR1和AHR2活性中的应用

说明书

本发明研究了斑点叉尾鮰各组织中核受体AHR1和AHR2的表达水平，表达水平最高的组织为鳃，可作为筛选具有激活核受体AHR1和AHR2作用的天然产物的目标组织，采用从天然产物提取纯化的单体口灌斑点叉尾鮰后采集鳃，检测核受体AHR1和AHR2的表达情况，筛选出具有激活核受体AHR1和AHR2的配体——姜黄素及其相似物去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素，经实验证实，姜黄素可使磺胺甲噁唑在斑点叉尾鮰可食组织中的残留量降低为原来残留量的2/5～7/10，残留时间由20 d缩短到15 d，因此，姜黄素及其相似物去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素可用于加速斑点叉尾鮰体内磺胺类化学药物残留的消除。

技术领域

本发明属于水产动物药理学技术领域，具体涉及天然产物在激活斑点叉尾鮰核受体AHR1和AHR2活性中的应用，所述的天然产物包括姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素。

背景技术

斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)亦称美洲鲶、沟鲶，属鲶形目(Silurfornes)，鮰科(Ictaluridae)，是美国最重要的水产养殖鱼类之一。斑点叉尾鮰肉质鲜美、细嫩、营养丰富，且具有降血脂功效，深受广大消费者的喜爱。我国于1984年由湖北省首次从美国引进斑点叉尾鮰，经过近20年的养殖实践与研究，已逐步形成了一整套涵盖亲本培育、鱼卵孵化、苗种培育、成鱼饲养、饵料配制、鱼病防治等方面的完整技术体系。斑点叉尾鮰在养殖过程中养殖企业或养殖户为预防和治疗斑点叉尾鮰的疾病大量使用药物，进而在斑点叉尾鮰体内形成药物残留，通过食物链进入人体后对人体健康造成影响。药物残留问题已成为制约斑点叉尾鮰产业的健康发展的关键问题之一。

目前很多受体都已经被证实是介导生物体药物代谢酶的关键因子，如核受体AHR能够在与核转运子ANRT形成二聚体的条件下对CYP1进行诱导。药物代谢酶与相关核受体在药物代谢和残留中起到关键作用。芳香烃受体(Aryl Hydrocarbon Receptor,AHR)也称二噁英受体，是调控外源毒性化合物代谢基因的关键核受体。通过二十多年的研究发现，除了作为外源物质的受体，参与代谢酶的转录调控。目前为止AHR基因家族至少有三个成员：AHR1、AHR2和AHRR(芳香烃受体抑制因子)。哺乳类和鸟类都只存在一个单一的AHR基因，而鱼类中却有两个不同的基因家系：AHR1(a1和a2)以及AHR2。鱼类AHR1基因缺乏与芳香烃化合物的高亲和力结合以及功能型激活区，没有与哺乳动物AHR类似的功能，鱼类AHR2基因具有与哺乳动物类似的功能。本发明对斑点叉尾鮰组织中核受体AHR1和AHR2的表达与分布进行分析，并对其具有激活功能的天然产物配体进行筛选，旨在为调控斑点叉尾鮰体内药物残留提供技术支撑，进而保障水产品的质量安全具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供了天然产物在激活斑点叉尾鮰核受体AHR1和AHR2活性中的应用，筛选出具有激活斑点叉尾鮰核受体AHR1和AHR2天然产物的配体——姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素，并将其应用于加速消除斑点叉尾鮰体内磺胺类药物残留。

为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

斑点叉尾鮰组织中核受体AHR1和AHR2的表达分布特征：

研究了斑点叉尾鮰各组织中核受体AHR1和AHR2的表达水平，核受体AHR1在斑点叉尾鮰组织中表达分布由高到低排列为鳃、肾、脾、心、脑、肉、肝、皮，核受体AHR2在斑点叉尾鮰组织中表达分布由高到低排列为鳃、脾、肾、脑、心、肝、肌肉、皮，通过表达水平找出核受体表达水平最高的鳃组织，为后续开展筛选核受体活性激活天然产物提供技术基础和目标组织。

斑点叉尾鮰核受体AHR1和AHR2激活配体天然产物单体的筛选：

采用从天然产物提取纯化的单体口灌斑点叉尾鮰后，采集斑点叉尾鮰的各组织检测核受体AHR1和AHR2的表达情况，筛选出具有激活核受体AHR1和AHR2活性的天然产物单体姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素。