[发明专利]替唑尼特和硝唑尼特在制备自噬诱导剂中的应用

说明书

本发明公开了替唑尼特和/或硝唑尼特及其药学上可接受的盐的新的医药用途，即其在制备制备自噬诱导剂中的用途，及用于治疗与抑制mTOR表达相关的疾病的药物的用途。在所述用途中，替唑尼特和/或硝唑尼特及其药学上可接受的盐可以通过降低PI3K、AKT蛋白磷酸化，以及降低ERK蛋白磷酸化起到相关药效，从而实现降低细胞内的自噬抑制作用，诱导细胞发生自噬。

技术领域

本发明涉及细胞自噬领域，具体涉及一种以替唑尼特和/或硝唑尼特为活性及含有替唑尼特和/或硝唑尼特的药物组合物，更具体地，涉及替唑尼特和硝唑尼特在诱导细胞自噬上的应用。

背景技术

替唑尼特(Tizoxanide，TIZ)和硝唑尼特(nitazoxanide，NTZ)都是硝噻柳酸酰胺的衍生物，其中替唑尼特是硝唑尼特在体内的主要活性代谢产物。自1970年代开始，人们发现替唑尼特和硝唑尼特对感染人和动物的厌氧菌及多种蠕虫、原虫等都有抑制作用。硝唑尼特作为抗寄生虫药已经于2002年被美国FDA批准用于治疗儿童蓝氏贾第鞭毛虫、隐孢子虫等肠道原虫感染引起的疾病。该药在非洲及南美多个国家使用结果表明，其抗寄生虫感染效果好，且无不良反应。研究认为硝唑尼特抗寄生虫及厌氧微生物的机制是干扰其丙酮酸：铁氧还蛋白还原酶(PFOR)所依赖的电子转移反应，这是寄生虫及厌氧菌能量代谢的重要步骤。另外，硝唑尼特抗某些病毒感染的机制尚未完全阐明。

由于硝唑尼特化学结构上的乙酰基很容易水解，因此硝唑尼特在动物或人体内都迅速地代谢成为替唑尼特(Tizoxanide，TIZ)，在机体内基本上检测不到硝唑尼特。替唑尼特在各种体内外药理和毒理学研究中的作用与硝唑尼特一致，因此，替唑尼特是硝唑尼特的体内活性物质，硝唑尼特是替唑尼特的前药形式，在其活性研究中常以替唑尼特替代硝唑尼特。

自噬(autophagy)是存在于真核细胞内的一种普遍生理现象，是真核细胞对抗压力与感染的保护机制，具体地讲是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物的过程，藉此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。由Ashford和Porter在1962年发现并提出，自发现以来受到越来越多科研工作者的关注。自噬分为三类：巨自噬(Macroautophagy)、微自噬(Microautophagy)及分子伴侣介导的自噬(Chaperonemediated autophagy，CAM)。一般研究所指的自噬是巨自噬(以下简称“自噬”)。正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，因此，必须对自噬进行人工干预和调节。在自噬研究中，寻找能够有效诱导细胞自噬的化学小分子至关重要。

目前，仅有研究表明替唑尼特和硝唑尼特能够抗各类寄生虫、厌氧细菌和某些病毒，但对于替唑尼特和硝唑尼特诱导细胞自噬未见任何报道。

我们对替唑尼特和硝唑尼特及其生物活性进行了较为系统的研究，尤其对其进行了诱导细胞自噬活性的研究。本专利即首次报道了替唑尼特和硝唑尼特的诱导细胞自噬活性。

发明内容

本发明提供了两种可诱导细胞自噬的药物：替唑尼特和硝唑尼特。该药物通过影响细胞mTOR信号通路相关蛋白的表达变化，从而诱导细胞自噬。

为实现上述目的，替唑尼特和硝唑尼特在制备诱导细胞自噬上的药物中的应用。

所述药物对细胞自噬的诱导作用是通过抑制细胞mTOR蛋白的表达和磷酸化发挥作用的。

所述细胞为哺乳动物或人源细胞，如RAW264.7细胞、HepG2细胞、Vero细胞、293T细胞、A549细胞、MDCK细胞等。

所述的细胞自噬过程中的诱导因素为抑制细胞中的mTOR蛋白的表达。

根据需求再提供一种替唑尼特和硝唑尼特在制备mTOR蛋白抑制剂、PI3K或ERK蛋白抑制剂中的应用。

根据需求再提供一种替唑尼特和硝唑尼特在制备mTOR、PI3K或ERK蛋白的研究制剂上的应用。