[发明专利]一种生鲜食材的预处理方法及氨基酸含量测定方法

权利要求书

1.一种生鲜食材的预处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)样品提取：称取0.1～2.0g样品，置于微波消解罐中，加入5～15ml体积分数为50％盐酸水溶液，再加入30～50mg苯酚，混合均匀；

(b)微波水解：迅速安装微波消解罐于微波消解仪上进行微波水解，设置微波消解仪在50℃～70℃温度中保持反应，然后再升至140℃～160℃的水解温度中保持反应，反应完成后，停止加热，待温度显示至室温时，取出微波消解罐，水解制成水解液；

(c)粗测水解液浓度：将水解液转移至50ml比色管中，用体积分数为50％盐酸水溶液定容至刻度，制成待测液，将待测液与标准液进行比色，粗略测出待测液浓度；

(d)测定液制备：准确移取1～2ml待测液于15ml试管内，在40～50℃水浴下氮吹干，形成残留物，加入1～3ml去离子水，溶解残留物，再次在水浴下氮吹干，重复加入去离子水并水浴氮吹干，加入1～2ml pH2.2柠檬酸钠缓冲溶液，将试管放置于超声波溶解仪中，超声波溶解处理，用孔径为0.22μm的聚醚砜滤膜过滤，制成样品测定液。

2.根据权利要求1所述的生鲜食材的预处理方法，其特征在于，所述步骤(b)具体为，迅速安装微波消解罐于微波消解仪上进行微波水解，微波消解仪设定在4～6min内从室温逐渐升高至50℃～70℃，保持50℃～70℃持续加热3～10min，调整微波消解仪温度，使其温度在3～5min内从50℃～70℃升至140℃～160℃，保持140℃～160℃持续微波加热15～25min，停止加热，待温度显示至室温时，取出微波消解罐。

3.根据权利要求1所述的生鲜食材的预处理方法，其特征在于，所述步骤(b)中，微波水解功率为800～1200W。

4.根据权利要求1所述的生鲜食材的预处理方法，其特征在于，所述步骤(c)中，水解液转移至50ml比色管的方法为：将微波消解罐中的水解液倒入50ml比色管中，用15～25ml体积分数为50％的盐酸水溶液至少分三次洗涤微波消解罐，将微波消解罐的洗涤液倒入50ml比色管中，混合均匀。

5.根据权利要求1所述的生鲜食材的预处理方法，其特征在于，所述步骤(d)中，超声波溶解仪的超声波强度为0.3～1W/cm²,超声波溶解温度为20～60℃，超声处理时间为3～10min。

6.一种生鲜食材的氨基酸含量测定方法，其特征在于，取如权利要求1～5中任一项所述生鲜食材的预处理方法制得的样品测定液测定生鲜食材的氨基酸含量，所述生鲜食材的氨基酸含量测定方法包括如下步骤：

(1)标准上机液配置：取2.5μmol/ml的混合氨基酸标准储备液0.5ml于5mL容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液定容至刻度，混合均匀，制成浓度为100nmol/ml标准上机液或分别制成浓度为5、25、100、250、1000nmol/ml的标准上机液；

(2)标准上机液测定：吸取浓度为100nmol/ml的标准上机液注入全自动氨基酸分析仪，采用外标法单点校正测定峰面积，或分别吸取不同浓度的标准上机液注入全自动氨基酸分析仪，采用外标法测定峰面积并制作标准曲线；

(3)生鲜食材中氨基酸含量的测定：取所述预处理方法制得的样品测定液，注入全自动氨基酸分析仪，采用外标法定量计算样品中氨基酸的含量。

7.根据权利要求6所述生鲜食材的氨基酸含量测定方法，其特征在于，所述步骤(2)和(3)中，全自动氨基酸分析仪的色谱条件为，色谱柱填充材料为磺酸型阳离子树脂，柱温为45～65℃，进样体积15～25uL，检测波长为440nm和570nm。