[发明专利]一种微凹黄檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用

说明书

本发明公开了一种微凹黄檀HPLC标准指纹图谱，包括6个特征峰，其中保留时间最长的特征峰为参照峰，且参照峰的峰面积在6个特征峰中排在前三位，RSD％<0.5％，6个特征峰的相对保留时间分别为：0.109，0.436，0.487，0.556，0.668，1.000，RSD％<0.8％。本发明还公开了微凹黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法和应用，其通过相似度分析以及对比特征峰的有无，可有效的进行微凹黄檀真伪鉴别。本发明为微凹黄檀真伪鉴定提供了新的技术手段，可作为现有真伪识别方法的一种验证和补充，结果准确可靠。

技术领域

本发明涉及红木真伪鉴定领域，尤其涉及一种微凹黄檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用。

背景技术

微凹黄檀(Dalbergia retusa Hemsl.)是一种蝶形花亚科，黄檀属红酸枝木类树木。主要产地是墨西哥及巴拿马等中南美州国家，商品名Cocobolo。其本身具有很高的的市场价值和使用价值，适用于主要用于制作高档家具及工艺品。从资源情况来看，市场上常见的微凹黄檀的产地有巴拿马和尼加拉瓜两个地方，微凹黄檀在当地的产量并不是很多，并且随着资源的逐渐开发，当地政府也开始逐渐限制微凹黄檀出口。由于对微凹黄檀过度的砍伐，使其被世界自然保护联盟列为易危品种，且受到《濒危野生动植物种国际贸易公约》的保护。在国家公园、保护区及种植地以外，它们已经接近灭绝。货源的稀少也给微凹黄檀提供极大的市场升值空间。如何准确鉴定微凹黄檀成为市场交易上的最大难题。目前对微凹黄檀的鉴别技术主要是依据基于人工经验的传统植物学分类法宏观构造特征归类，我国现行的国家标准GB/T 18107-2017《红木》对微凹黄檀的鉴别方法加以木材解剖学为依据。但是以上方法操作过程复杂，对样品的损伤严重，结果也有一定的主观不确定性。也有人尝试将分子生物学DNA鉴定技术引入红木的鉴定中来，但是由于红木样品无论是家具还是木材往往保存时间已经很长，由于红木是心木，心木的细胞往往已经死亡很久，DNA受到很大程度的破坏，DNA的提取受到很大限制，所以很难应用到实际中。

化学指纹图谱技术根据天然物质中化学物质整体信息为基础，借助数据挖掘技术和化学计量学算法进行指纹图谱构建，在天然物质的真伪鉴别上已经应用很广，特别是在中药材的质量控制、道地性和真伪鉴别方面受到国际社会的认可。目前还没有将化学指纹图谱技术应用在微凹黄檀的真伪鉴别中。

因此，本领域的技术人员致力于开发一种微凹黄檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法，该方法结果准确可靠，取样量少，对样品无损检测，具有客观统一的标准。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是现有技术中微凹黄檀真伪鉴别操作过程复杂，对样品损伤严重，结果受主观不确定因素的影响大。

为实现上述目的，本发明提供了一种微凹黄檀HPLC标准指纹图谱，包括6个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰为参照峰，且所述参照峰的峰面积在6个所述特征峰中排在前三位，RSD％<0.5％，6个所述特征峰的相对保留时间分别为：0.109，0.436，0.487，0.556，0.668，1.000，RSD％<0.8％。进一步地，6个特征峰的保留时间分别为：9.421min、37.819min、42.222min、48.199min、57.872min、86.645min，RSD％<0.8％。进一步地，6个所述特征峰的相对峰面积分别为：：0.026，1.171，0.718，0.112，1.316，1.000，RSD<3.0。

另一方面，本发明提供了一种微凹黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

步骤一、供试品溶液的制备：称取微凹黄檀心材部分木屑，置于50mL离心管中，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液；