[发明专利]一种赛州黄檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用在审
| 申请号: | 201910243613.0 | 申请日: | 2019-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN110031574A | 公开(公告)日: | 2019-07-19 |
| 发明(设计)人: | 魏建华;吴剑光;林隆强;李冠斯;刘玉莉 | 申请(专利权)人: | 汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/74;G01N30/86 |
| 代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
| 地址: | 515031 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 特征峰 标准指纹图谱 构建 保留 相似度分析 对比特征 技术手段 真伪鉴别 真伪鉴定 真伪识别 应用 验证 补充 | ||
1.一种赛州黄檀HPLC标准指纹图谱,其特征在于,包括13个特征峰,以保留时间最长的所述特征峰为参照峰,13个所述特征峰的相对保留时间分别为:0.367,0.524,0.545,0.560,0.657,0.668,0.692,0.704,0.735,0.756,0.803,0.918,1.000,RSD%<0.3%;其中相对保留时间为0.803的所述特征峰的峰面积最大。
2.如权利要求1所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱,其特征在于,13个所述特征峰的相对峰面积分别为:0.5193,0.6501,0.1654,0.3058,1.3638,1.1233,1.4133,0.2776,0.1861,0.7472,2.9318,0.5195,1.000,RSD<1.0。
3.一种如权利要求1所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、供试品溶液的制备:称取赛州黄檀心材部分木屑,置于50mL离心管中,加入甲醇、高纯水,震摇,超声提取,滤纸过滤,微孔滤膜过滤,得到所述供试品溶液;
步骤二、将步骤一制得的所述供试品溶液进行HPLC检测,以水为流动相A,乙腈为流动相B,流速为1.0mL/min,检测波长为290nm,柱温为30℃,流动相采用梯度洗脱方式:从0~20min,所述流动相B的体积百分含量由8%提高至23%,所述流动相A的体积百分含量由92%降低至77%;从20~33min,所述流动相B的体积百分含量为23%,所述流动相A的体积百分含量为77%;从33~43min,所述流动相B的体积百分含量由23%提高至30%,所述流动相A的体积百分含量由77%降低至70%;从43~53min,所述流动相B的体积百分含量30%,所述流动相A的体积百分含量为70%;从53~69min,所述流动相B的体积百分含量由30%提高至38%,所述流动相A的体积百分含量由70%降低至62%;从69~76min,所述流动相B的体积百分含量38%,所述流动相A的体积百分含量为62%;从76~91min,所述流动相B的体积百分含量由38%提高至49%,所述流动相A的体积百分含量由62%降低至51%;从91~92min,所述流动相B的体积百分含量49%,所述流动相A的体积百分含量为51%;从92~95min,所述流动相B的体积百分含量由49%降低至8%,所述流动相A的体积百分含量由51%提高至92%;从95~103min,所述流动相B的体积百分含量8%,所述流动相A的体积百分含量为92%。
4.如权利要求3所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法,其特征在于,所述赛州黄檀心材部分木屑的称取量为0.2g,所述甲醇的加入量为5mL,所述高纯水的加入量为5mL,所述震摇的时间为5min,所述微孔滤膜的孔径为0.2μm。
5.如权利要求3所述的构建方法,其特征在于,还包括步骤三、分析比较多批来源不同的赛州黄檀的HPLC检测结果,得到由其共有特征峰构成的所述赛州黄檀HPLC标准指纹图谱。
6.如权利要求5所述的赛州黄檀HPLC标准指纹图谱的构建方法,其特征在于,所述步骤三具体为:将7批来源不同的所述赛州黄檀的HPLC检测结果导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”,选取时间窗宽度为0.2min,以中位数生成对照谱图,经过校正后自动匹配,生成赛州黄檀指纹图谱共有模式,并计算所述7批来源不同的赛州黄檀的HPLC检测结果与所述赛州黄檀指纹图谱共有模式的相似度,使得所述相似度在0.8以上,得到由其共有特征峰构成的所述赛州黄檀HPLC标准指纹图谱。
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