[发明专利]化合物富马酸酮替芬在促进干细胞因子合成和分泌中的用途

说明书

本发明为化合物富马酸酮替芬在促进干细胞因子合成和分泌中的用途，提出了式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在促进干细胞因子合成和分泌中的用途。发明人通过实验发现，富马酸酮替芬能够有效提高基质细胞总SCF的表达和分泌，可作为有效地促进内源SCF合成和分泌的激动剂，并且富马酸酮替芬能够有效促进原始造血干细胞增殖；式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药能够显著促进干细胞因子合成和分泌。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地，本发明涉及化合物在促进干细胞因子合成和分泌中的用途，更具体地，本发明涉及化合物在促进干细胞因子合成和分泌中的用途、培养基、化合物在在制备培养基或药物中的用途、促进干细胞因子合成和分泌的方法、促进造血干/祖细胞增殖的方法。

背景技术

由基质细胞、细胞因子及细胞外基质等组成的造血微环境参与调控造血干细胞的自我更新及增殖分化。在众多参与维持造血干细胞稳态的造血调控因子中，干细胞因子(Stem cell factor，SCF，又称为Kit配体或肥大细胞生长因子)是由基质细胞所产生的一种酸性糖蛋白，在人骨髓及血清中均可被检测到。大量研究证据表明，在早期造血干/祖细胞增殖分化及动员归巢过程中，SCF均发挥关键的调控作用，并主要包括以下几方面：1.调控造血干细胞的增殖及分化。在体外培养条件下,SCF能够单独或协同其他造血细胞因子促进造血干/祖细胞的体外增殖，并支持其向特定造血谱系的定向分化。2.参与造血干细胞的动员。利用动物模型研究发现，SCF与G-CSF等细胞因子联用能够提高外周血中总有核细胞数、CD34+细胞数量及造血集落数量，表明其可能是一种潜在的造血动员剂。3.促进造血干细胞的归巢。体内外研究证据表明，SCF能够调控造血干细胞表面黏附蛋白的表达水平，与SDF-1α协同作用参与造血干细胞归巢并定植于骨髓微环境中。4.SCF能够促进辐射损伤后造血功能的恢复重建。来自动物模型的研究表明，SCF能够提高受辐照动物的生存率，缩短血小板及中性粒细胞恢复周期，表明其可能是一种效果持久、疗效广谱的抗放药。

因此，筛选能激活内源性SCF细胞因子分泌的激动剂，具有十分重要的临床意义和应用前景。

发明内容

本申请是基于发明人对以下事实和问题的发现和认识作出的：

在本发明中，发明人利用高通量分析技术，筛选到一种能够促进骨髓基质细胞分泌SCF的小分子化合物富马酸酮替芬(ketotifen fumarate)，化学名称为4，9-二氢-4(1-甲基-4-亚哌啶基)-10H-苯并[4，5]环庚[1，2-α]噻吩-10酮反丁烯二酸盐。在申请中，发明人发现，在小鼠骨髓基质细胞培养体系中添加0-10μM富马酸酮替芬处理后，利用WesternBlot检测细胞裂解物SCF蛋白表达水平，发现与溶剂对照组相比，富马酸酮替芬能够显著提高细胞总SCF的表达水平，并具有剂量依赖效应；利用ELISA法检测培养上清中可溶性SCF浓度同样发现，富马酸酮替芬能够有效刺激细胞分泌可溶型SCF蛋白。表明富马酸酮替芬具有促进小鼠骨髓基质细胞SCF合成及分泌的作用，是一种潜在的SCF激动剂。此外，研究发现，在SCF存在的培养条件下，添加富马酸酮替芬处理人脐血CD34⁺细胞12天，细胞培养物中原始造血干细胞(CD34⁺CD38^-CD90⁺CD45RA^-CD49f⁺细胞)比例及总数量均较对照组显著增加。该实验表明富马酸酮替芬作为一种体外培养添加剂，能够有效促进原始造血干细胞增殖。这些实验证据有力支持富马酸酮替芬作为一种促进内源SCF合成分泌的激动剂，成为一种安全有效的潜在靶向药物，用于调节造血干/祖细胞增殖、动员归巢及再生重建。

为此，在本发明的第一方面，本发明提出了式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在促进干细胞因子合成和分泌中的用途，