[发明专利]一种检测次氯酸的荧光探针分子及其制备方法

说明书

本发明公开了一种检测次氯酸的荧光探针分子及其制备方法。该荧光探针分子具体涉及一种HClO特异性响应的荧光探针分子。该荧光探针分子由合成路线方法制成。本发明的优点在于可以通过改变R1来设计不同类型的荧光探针，探针分子对HClO的选择特异性强、响应速度快、荧光强度的变化具有浓度依赖性，可实现定量分析，在复杂的体系中对HClO具有较高的选择性和特异性。

技术领域

本发明属于HClO检测技术领域，具体涉及一种HClO特异性响应的荧光探针分子。

背景技术

次氯酸(HClO)是生物体内重要的活性氧(ROS)之一，它在生命体中属于一种内源性活性氧(ROS)，是在髓过氧化物酶(MPO)催化下由H₂O₂和Cl^-反应产生的，主要发生在白细胞中(如单核细胞，嗜酸性细胞，嗜中性粒细胞等)。

作为一种高效杀菌剂，HClO被用于杀灭入侵性细菌、病毒、孢子以及一些原生类微生物。更重要的是，它在生物系统的氧化还原平衡调控中发挥着至关重要的作用和维持细胞的正常功能的作用。一方面，高度活跃的次氯酸是一个关键的细胞信号传导因子，它通过体内平衡和抗感染防御机制，在抗炎和细胞凋亡的调控中发挥着重要的作用。另一方面，由于HClO能与各种生物分子反应，包括DNA、核糖核酸、脂肪酸、胆固醇、蛋白质等，细胞免疫反应产生的过量或不可控的次氯酸导致细胞组织损伤，会引发神经退行疾病、心血管疾病、肺损伤、动脉粥样硬化、骨关节炎和癌症等疾病。

因次，开发高特异性和高灵敏的荧光探针分子用于次氯酸的非侵入式和快速可视化检测具有十分重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种新的HClO检测的荧光探针分子及其制备方法，该探针分子对次氯酸具有良好的选择性和响应性。

本发明解决其技术问题采用以下的技术方案：

本发明提供的检测次氯酸的荧光探针分子，是一种HClO特异性响应的荧光探针分子，结构式为：

结构式中，R1是各自独立地选自氢原子，烷基或醚链，或环烷基，取代的烷基或环烷基。

所述的检测次氯酸的荧光探针分子，其采用2-6个碳的烷基或醚链，或环烷基，取代的烷基或环烷基。

所述的检测次氯酸的荧光探针分子，用于次氯酸的非侵入式和快速可视化检测。

本发明提供的检测次氯酸的荧光探针分子的制备方法，具体是采用以下合成路线方法制备上述的检测次氯酸的荧光探针分子：

上述符号中：S1是碱性蓝3，S2是酰硫类化合物；a代表反应条件为：连二亚硫酸钠、碳酸钠、超纯水、二氯甲烷，b代表反应条件为：碳酸钠、二氯甲烷。

本发明检测次氯酸的荧光探针分子的制备方法，其制备过程是：

(1)将化合物S1溶解在水中搅拌均匀，加入二氯甲烷和Na₂CO₃，然后混合物在40℃和氮气下搅拌均匀；

(2)将连二亚硫酸钠溶解在水中，用注射器将其直接注入上述反应体系中，再将反应液在40℃和氮气下搅拌直至溶液变色，然后将该体系在冰水浴下冷却；

(3)冷却至室温后，将体系中上层水相用注射器吸出；

(4)将酰硫类化合物S2溶解在二氯甲烷中，然后，冰浴条件下，将其滴加至上步骤(3)所述体系中并在室温下搅拌2小时，反应结束后，用二氯甲烷萃取并合并有机相；

(5)将所得有机相用无水硫酸钠干燥，然后减压浓缩用柱层析色谱法纯化。

(6)柱层析色谱法纯化，洗脱液采用乙酸乙酯和石油醚。