[发明专利]淀粉酶突变体ZDAMYA及其编码基因和应用有效
申请号: | 201910227641.3 | 申请日: | 2019-03-25 |
公开(公告)号: | CN109897842B | 公开(公告)日: | 2020-12-11 |
发明(设计)人: | 罗会颖;黄火清;邱锦;王亚茹;涂涛;王苑;柏映国;苏小运;姚斌 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12N9/26 | 分类号: | C12N9/26;C12N15/56;C12N1/21;C12R1/07 |
代理公司: | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人: | 刘静荣 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 淀粉酶 突变体 zdamya 及其 编码 基因 应用 | ||
本发明属于生物技术领域,具体涉及淀粉酶突变体ZDAMYA及其编码基因和应用。本发明的淀粉酶突变体ZDAMYA,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供的突变酶酶活力由比野生型提高53%;突变后催化效率较野生型相比提高了1.52倍。因此,本发明提供的淀粉酶突变体能很好的满足食品、医药、饲料以及纺织工业等领域中应用的需求,具有广阔的应用前景。
技术领域
本发明属于农业生物技术领域,具体涉及淀粉酶突变体ZDAMYA及其编码基因和应用。
背景技术
淀粉酶是水解淀粉分子内的α-1,4糖苷键和α-1,6糖苷键得到葡萄糖、寡糖或者糊精等产物的一类酶。淀粉酶对于糊化淀粉具有很强的水解作用,因此可以迅速将淀粉水解,使其粘度降低,流动性增高,利于淀粉的糖化。啤洒是最早用酶酿造的产品之一,在啤洒酿造中添加淀粉酶可使淀粉快速液化以取代一部分麦芽,从而降低成本。此外,淀粉酶还普遍应用在医药、洗涤剂、焙烤、酒精工业、饲料以及纺织等行业。
高水解活力的淀粉酶在生产应用过程中有很大的优势,可以节约投资,提高产率,或作为饲料添加剂提高动物对营养物质的吸收效率。目前,国内外已经克隆表达出很多新型的淀粉酶,但这些酶在某些性质上存在一些缺点,从而限制其应用。例如,水解能力差、在酸性条件下稳定性差,或高温条件下稳定性不好等。虽然可以通过定向进化及理性分子改造方法获得淀粉酶工程菌株,但是进化的突变体的性状往往不可控制。因此,找到新的能够满足实际应用需求的淀粉酶,进一步推广其在饲料、食品、医药等行业中应用是产业上的迫切需求。
发明内容
本发明的目的在于提供一种淀粉酶突变体ZDAMYA。
本发明的再一目的在于提供上述淀粉酶突变体ZDAMYA的编码基因。
本发明的再一目的在于提供包含上述淀粉酶突变体ZDAMYA基因的重组表达载体。
本发明的再一目的在于提供包含上述淀粉酶突变体ZDAMYA的重组菌株。
本发明的再一目的在于提供上述淀粉酶突变体ZDAMYA的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述淀粉酶突变体ZDAMYA的应用。
根据本发明具体实施方式的野生型淀粉酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示:
根据本发明具体实施方式的淀粉酶突变体ZDAMYA,将野生型淀粉酶氨基酸序列进行S62A/D63E/I64H/L473K/K474H/N475K突变,得到的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示:
根据本发明具体实施方式的野生型淀粉酶的编码基因,其核苷酸序列如SEQ IDNo.3所示:
根据本发明具体实施方式的淀粉酶突变体编码基因ZDAMY,其核苷酸序列如SEQID No.4所示:
根据本发明具体实施方式的含有淀粉酶突变体ZDAMYA基因的重组表达载体,优选为pHYP16-ZDAMY。
根据本发明具体实施方式的含有淀粉酶突变体ZDAMYA基因的重组菌株,菌株优选为SCK6/ZDAMY。
根据本发明具体实施方式的淀粉酶突变体ZDAMYA的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)用包含淀粉酶突变体ZDAMYA编码基因的重组表达载体转化宿主细胞,得到重组菌株;
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