[发明专利]基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法

权利要求书

1.基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

步骤1)自溶预处理：将高活性干酵母与提取助剂混合后，添加纯水搅拌自溶，所得自溶混合液离心，去上清得到较干净的酵母细胞壁；

步骤2)球磨破壁：所得酵母细胞壁与球磨珠混合后球磨得到细粉；

步骤3)溶剂提取：经过自溶预处理和球磨破壁的酵母粉经稀碱提取、蛋白酶纯化，调节pH至3.0～9.0，依次采用醇类溶剂和醚类溶剂洗涤数次，干燥得到酵母β-葡聚糖。

2.根据权利要求1所述的基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：球磨转速为20-500rpm，优选20-100rpm；优选地，所述球磨时间为10-50min，优选30-40min。

3.根据权利要求1所述的基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：自溶时间为8-36h，优选24-48h；优选地，所述的自溶温度为30-80℃min，优选30-60min；另优选地，自溶pH为4.0-8.0，优选4.0-6.0。

4.根据权利要求1所述的基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：所述的提取助剂选自NaCl、NaCHCO₃、Na₂CO_3、NaHSO₃中的一种或者两种以上，添加纯水后所述提取助剂的质量浓度为2-10％，优选2-5％，更优选3％。

5.根据权利要求1所述的基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：稀碱提取采用二次碱提；优选地，所述的二次碱提的稀碱浓度分别为4％、3％的NaOH溶液。

6.根据权利要求1所述的基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：所述蛋白酶为木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、纤维素酶中的一种或多种。

7.根据权利要求1所述的基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：所述步骤2)中蛋白酶纯化后调节pH至4.0-7.0；优选为6.0～7.0。

8.根据权利要求1所述的基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法，其特征在于：该方法具体包括如下步骤：

步骤1)自溶预处理：将含水率不大于12％的干燥高活性耐糖面包酵母与提取助剂混合后，加入纯水溶解，pH为4.0～7.0，温控及搅拌自溶，在40-50℃下控温搅拌提取8-36h，所得提取液3000rpm离心15min，倾倒去上清得到酵母细胞壁；

步骤2)球磨破壁：所得酵母细胞壁与球磨珠混合后，经20-700rpm球磨处理20-50min后得到细粉；

步骤3)溶剂提取：经过自溶预处理和球磨破壁的酵母粉依次经4％NaOH溶液、3％NaOH溶液提取，所得提取液3000rpm离心15min，得到沉淀，经蛋白酶纯化，调节至pH为6.0～7.0后，依次采用无水乙醇、无水乙醚洗涤后，产物经冷冻干燥得到酵母β-葡聚糖。

9.根据权利要求1～8任意一项所述方法获得的酵母β-葡聚糖。

10.根据权利要求9所述的酵母β-葡聚糖在制备治疗或者预防便秘、改善肠道菌群疾病药物、食品或者保健品中的应用。