[发明专利]一种细胞保存液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种细胞保存液，其特征在于，含有以下组分：Na₂HPO₄、葡萄糖、柠檬酸、腺嘌呤、NaCl及水。

2.如权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述水为纯水。

3.如权利要求2所述的细胞保存液，其特征在于，所述细胞保存液含有以下终浓度的组分：

Na₂HPO₄ 0.1-10g/L；

葡萄糖 0.1-50g/L；

柠檬酸 0.1-10g/L；

腺嘌呤 0.1-10g/L；

NaCl 0.01-500mmol/L；

上述各组分的溶剂均为水。

4.一种权利要求3所述的细胞保存液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将配方量的Na₂HPO₄、葡萄糖、柠檬酸、腺嘌呤、NaCl与水混合均匀，即得。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括混合后进行过滤和/或分装的步骤。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述分装的体积为100～300μl/管。

7.一种权利要求3所述的细胞保存液在流式细胞仪检测中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：

1)提供含有细胞的样本液；

2)将上述细胞保存液与所述样本液混合，其中所述细胞保存液与所述样本液的体积比为1:5～1:10；

3)将步骤2)获得的混合物保存；

4)将步骤3)获得的混合物取出50-100μl与荧光标记的流式单克隆抗体20μl混合加入流式管，混匀后避光孵育15分钟；

5)向步骤4)孵育的流式管中加入溶血素2ml，混匀后室温孵育10分钟，200-300g，离心5分钟，倾倒弃去上清并以200μlPBS重悬样本；

6)流式细胞仪检测步骤5)重悬的流式管，并计算结果；

7)一周后取出进行重复测试。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，步骤1)中所述样本液为血液、骨髓或细胞悬浮液；步骤4)中所述流式单克隆抗体包括各5μl的CD45-FITC、CD13-PE、CD33-PerCP-cy5.5和CD7-APC。

10.一种含有权利要求3所述的细胞保存液的保存剂。

11.如权利要求10所述的保存剂，其特征在于，所述保存剂还包含样本液，所述细胞保存液与所述样本液的体积比为1:5～1:10。

12.如权利要求10所述的保存剂，其特征在于，所述样本液为血液、骨髓或细胞悬浮液。

13.一种权利要求10-12任一项所述的保存剂在用于流式细胞仪检测或在制备用于流式细胞仪检测的试剂盒中的应用。

14.如权利要求13所述的应用，其特征在于，所述流式细胞仪检测为白细胞表面抗原及胞内抗原的检测。