[发明专利]检测血液中帕罗西汀药物含量液相色谱分析方法

说明书

本发明采用液相色谱分析方法检测血液样本中帕罗西汀的血药浓度含量，该检测方法利用高效液相色谱仪和荧光检测器对标准溶液进行标定，分别拟合得出代表帕罗西汀浓度的标准曲线方程为y＝a*x+b，取待测血液样品，对该待检测血液样品经过前处理后，使用相同的高效液相色谱仪和荧光检测器对待测的样品进行检测，得到待测血液y值，将待测血液样品的y代入上述标准曲线方程中，通过计算分别得到待测血液样品中帕罗西汀的相对浓度x，内标物工作液浓度是已知的，通过计算可以得到待检测血液样品中的帕罗西汀的浓度，本发明为帕罗西汀的给药提供实验基础。

技术领域

本发明涉及精神类药物的临床血药浓度监测技术领域，尤其涉及一种检测血液中抗抑郁药物奥帕罗西汀含量的方法。

背景技术

抑郁症又称抑郁障碍，以显著而持久的心境低落为主要临床特征，是心境障碍的主要类型。帕罗西汀(Paroxetine)是一种苯基哌啶衍生物，分子式为C₁₉H₂₀FNO₃，具体结构如图1所示。是SSRI，可选择性地抑制5-HT转运体，阻断突触前膜对5-HT的再摄取，延长和增加5-HT的作用，从而产生抗抑郁作用。常用剂量时，除微弱地抑制NA和DA的再摄取外，对其他递质无明显影响。口服后可完全吸收，生物利用度50％，食物或药物均不影响其吸收。主要经肝脏代谢，生成尿苷酸化合物，其中部分代谢经CYP2D6介导。最后经肾脏排出体外，小部分经胆汁分泌从粪便排出。帕罗西汀的有效血药浓度参考区间为：20.0～65.0ng/mL，实验室警戒浓度为120ng/mL。常见不良反应有轻度口干、恶心、厌食、便秘、头疼、震颤、乏力、失眠和性功能障碍。偶见神经性水肿、荨麻疹、体位性低血压。罕见锥体外系反应的报道。

目前测定血液中帕罗西汀含量通常采用的方法为高效液相色谱法和高效液相色谱质谱联用法。其中，高效液相色谱质谱联用法分析成本高，对场地要求较高，且需要专业人员进行操作，不适合在中小医院广泛开展。高效液相色谱法具有定量准确，重现性好，成本低等优点，但已被报道的文献方法大多存在着前处理操作较复杂，外标法定量易导致结果不够准确，分析时间较长等问题，尚不适于大通量的样本检测。

发明内容

针对上述技术问题，本发明目的是提供一种检测血液中帕罗西汀血药含量的方法，将内标法与高效液相色谱法相结合，使帕罗西汀血药含量的测定结果更准确，并缩短样品分析时间。

为了完成本申请的发明目的，本申请采用以下技术方案：

本发明的一种检测血液样品中帕罗西汀血药浓度的液相色谱分析方法，其中：它包括以下步骤：

(一)标准溶液的标定

(a)标准工作液的配制：

精确称取帕罗西汀标准品10mg置于5mL容量瓶，用甲醇进行溶解，并定容于5mL，得到标准储备液A，将标准储备液A用含40-60％甲醇的水溶液进行稀释，分别在含有160-5400ng/mL帕罗西汀的浓度范围内配置出各标准工作液，并在-80℃条件下保存；

(b)内标工作液的配制：

精确称取维拉帕米标准品5mg于5mL容量瓶，用甲醇溶解，并定容至5mL，得到标准储备液B，将标准储备液B用含40-60％甲醇的水溶液进行稀释，得到含有浓度为5μg/mL维拉帕米的内标工作液，并在-80℃条件下保存；

(c)用标准溶液标定，得到标准曲线方程：