[发明专利]臭椿根皮总生物碱及制备方法和应用

说明书

本发明属于医药技术领域，涉及从植物臭椿的根皮中提取得到的臭椿根皮总生物碱及其制备方法，是将臭椿干燥根皮用甲醇或者乙醇提取，将所得提取物用乳酸溶解，通过离子交换树脂得到粗提物，用甲酸溶解粗提物后，用NaOH调PH为10～12，最后用氯仿萃取，减压回收溶剂，干燥，得到含量较高的臭椿根皮总生物碱。本发明提供的总生物碱具有良好的抗肝癌活性，可以开发成一种新的抗肿瘤药物。本方法设计合理，具有过程工艺简单，可工业化生产的特点。

技术领域

本发明涉及植物医药技术领域，涉及臭椿根皮总生物碱及制备方法和应用，尤其涉及药用植物臭椿的根皮中具有抗肝癌活性总生物碱的制备方法。

背景技术

肝癌已经成为我国严重的健康问题。所以寻找肝癌特效的治疗药物成为亟需解决的问题。臭椿(Altissima)为苦木科(Simaroubaceae)臭椿属(Ailanthus)植物。由于其树皮和树叶具有苦味且小叶基部腺挥发出特殊臭味而得名为臭椿。我国除黑龙江、吉林、新疆、青海、宁夏、甘肃和海南外，各地均有分布。椿根皮，又称椿白皮、樗白皮，为臭椿的干燥根皮或干皮，是中国的传统中草药。中国药典中对其药用功效描述为清热燥湿、收涩止带、止泻、止血，用于治疗赤白带下、湿热泻痢、久泻久痢、便血及崩漏。椿皮的主要化学成分主要含苦木苦味素、三萜、生物碱及挥发性成分。研究报道椿皮抗肿瘤成分多集中在苦木苦味素类化合物，四环三萜类成分也具有一定的抗肿瘤活性。在本发明前，未见有臭椿根皮总生物碱抗肝癌活性的报道。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种臭椿根皮中总生物碱，所述的总生物碱具有明显的抗肝癌活性，可以用于制备抗肿瘤药物。

本发明的目的之二是提供所述的臭椿根皮总生物碱的制备方法。

本发明提供了一种臭椿根皮中总生物碱，并通过以下方法制备：

将臭椿干燥根皮用甲醇或者乙醇提取，所得浸膏用乳酸溶液溶解后，通过离子交换树脂得到粗提物，然后再用甲酸溶解，用NaOH调PH为10～12，最后用氯仿萃取，得到含量较高的臭椿根皮总生物碱。

进一步地，本发明通过如下方法制备：

(1)将臭椿根皮粉碎成粗粉，用75～85％的甲醇或乙醇提取3～5次，减压浓缩得到臭椿根皮提取物；

(2)将所得的臭椿根皮提取物用PH＝3～5的乳酸溶液溶解，过滤，得到0.8g/ml的溶液；

(3)将过滤所得的酸液分别选用一种阳离子交换树脂(Amberlite IR-116、Dowex50×1、Diaion SK-103)动态吸附，使用4～6％的氨水洗脱4～6个保留体积后，用PH＝2～3，浓度为60～80％的乙醇洗脱4～6个保留体积，回收溶剂得到臭椿根皮总生物碱粗提物；

(4)将所得的臭椿根皮总生物碱粗提物用PH＝2～3的甲酸溶液溶解，过滤，除去残渣，制成0.8～1.2g/ml的溶液后，使用NaOH溶液调PH＝10～12；

(5)使用氯仿对所得碱液萃取，回收氯仿，得到最终的臭椿根皮总生物碱。

按照此方法制备的臭椿根皮总生物碱含量以canthin-6-one计，在415nm波长出测定吸光度，检测结果表示臭椿根皮总生物碱含量可以达到75％以上。

本专利的目的之三是提供臭椿根皮总生物碱在制备抗肝癌药物中的新用途。所述的臭椿根皮总生物碱具有比臭椿根皮总提物更强的肿瘤增殖抑制活性，并且可以抑制裸鼠移植Hep3B肿瘤的生长。

采用MTT法测试臭椿根皮总生物碱对人肝癌MHCC97H细胞株,SMCC7721细胞株,HepG2细胞株,Hep3B细胞株的体外抗肿瘤作用。试验结果表明臭椿根皮总生物碱在体外对上述四种细胞株具有显著的细胞增殖抑制活性，IC₅₀值分别为15.37μg/ml，17.92μg/ml，21.93μg/ml，24.37μg/ml。