[发明专利]诱导体细胞重编程的因子以及使用该因子诱导体细胞重编程的方法在审
| 申请号: | 201910188173.3 | 申请日: | 2019-03-13 |
| 公开(公告)号: | CN110029086A | 公开(公告)日: | 2019-07-19 |
| 发明(设计)人: | 裴端卿;刘晶;王波;吴琳琳;刘雨婷 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号: | C12N5/074 | 分类号: | C12N5/074;C12N15/867;C12N5/10;C12Q1/02 |
| 代理公司: | 北京三环同创知识产权代理有限公司 11349 | 代理人: | 邵毓琴;李晶 |
| 地址: | 510530 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 体细胞 重编程 诱导 多能性干细胞 干细胞 药物筛选 再生医学 器官移植 制备 基因 应用 | ||
1.一种诱导体细胞重编程至多能性干细胞的因子,该因子包含下述基因:Jdp2,Nanog,Essrb,Sall4,Kdm2b,Mkk6和Glis1。
2.权利要求1所述的因子在制备诱导多能性干细胞中的应用。
3.一种诱导体细胞重编程制备多能性干细胞的方法,该方法包括:将权利要求1所述的因子导入所述体细胞。
4.如权利要求3所述的方法,其中,所述导入是通过将权利要求1所述的因子克隆至病毒载体,随后将所述病毒载体转染进病毒包装细胞并由病毒感染所述体细胞而进行的。
5.如权利要求4所述的方法,其中,所述感染进行两次,在首次感染体细胞之后,将感染后的体细胞在含有10%胎牛血清的高糖DMEM培养基中进行培养;
在二次感染体细胞之后,在iCD1培养基中培养感染后的体细胞,持续使体细胞能够获得多能性的时间段。
6.如权利要求4或5所述的方法,其中,所述病毒载体是逆转录病毒载体,所述病毒包装细胞是PlatE细胞。
7.如权利要求5所述的方法,其中,所述时间段为5天至7天。
8.如权利要求5所述的方法,其中,所述iCD1培养基中补充有5μM的Rock抑制剂Y27632。
9.如权利要求3至8中任一项所述的方法,其中,所述体细胞选自:成纤维细胞、尾尖成纤维细胞、骨髓衍生的单核细胞、骨骼肌细胞、脂肪细胞、外周血单核细胞、巨噬细胞、肝细胞、角质细胞、口腔角质细胞、头发毛囊真皮细胞、胃上皮细胞、肺上皮细胞、滑膜细胞、肾细胞、皮肤上皮细胞、成骨细胞、神经干细胞和真皮细胞。
10.由权利要求3至9中任一项所述的方法培养得到的多能性干细胞。
11.权利要求10所述的多能性干细胞在药物筛选中的应用。
12.权利要求10所述的多能性干细胞在器官移植中的应用。
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