[发明专利]一种心肌标志物质控品的制备方法

说明书

本发明公开了一种心肌标志物质控品的制备方法，采用正常人血清作为基质液，温浴1‑3小时后用滤膜除去杂质，得到的质控品基质液中添加CK、CK‑MB、cTnI、cTnT、CRP、BNP、MYO、NT‑proBNP、HCY、H‑FABP、Dig等心肌标志物阳性物质，制得高、中、低三浓度水平质控品溶液，加入适量的防腐剂、蛋白保护剂和稳定剂后混合均匀，进行调试测定，检测结果符合质量标准后，分装于玻璃瓶中，低温真空干燥呈冻干态后2~8℃保存。本发明质控品选用正常人血清/正常人血浆/去激素人血清/去脂类人血清作为基质液，根据临床实际需求制备出的性能稳定的多项目心肌标志物质控品，粘度低、复溶快，基质效应小，具有非常好的临床实用性，非常利于临床的推广和发展。

技术领域

本发明涉及生物制品技术，尤其是涉及一种心肌标志物质控品的制备方法。

背景技术

心肌标志物是目前临床检验科常规检测项目。由于大多数心肌标志物的结构不稳定，目前尚缺乏统一标准，造成采用不同的检测方法或使用不同厂家的检测产品所得的检测结果可能出现不一致的不良后果。目前多数厂家生产的检测试剂盒内均不含质控品，而临床实验室自己配制质控品又受到诸多因素的影响，所以在临床检验科中心肌标志物检测的质量控制现状不容乐观，亟待改善。个别心肌标志物（例如：BNP、NT-proBNP、cTnI）因为抗原结构的特殊性，在临床血清中容易受到血清中各种酶类干扰，稳定性不好，使得产品性能不能满足临床要求；市面上有些心肌标志物质控品采用的是非人血清基质，与临床样本基质存在明显差异，容易造成质控品与临床样本检测趋势不一致，引起基质效应。所以临床上急需商品化人血清基质的第三方心肌标志物多项复合质控品用于实验室的室内质量控制和室间质量评价。

发明内容

本发明的目的在于提供一种性能稳定的多项目心肌标志物质控品的制备方法，以满足临床使用。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的心肌标志物质控品的制备方法，包括下述步骤：

第一步，采用正常人血清作为基质液，将血清复溶恢复室温后在40-60℃温度下水浴1-3小时；

第二步，将第一步水浴后的血清用孔径0.22μm-0.65μm的滤膜除去杂质，得到质控品基质液；

第三步，在第二步制得的基质液中添加以下心肌标志物阳性物质：肌酸激酶（CK）10-700U/L、肌酸激酶同工酶5-200ng/ml 、肌钙蛋白I (cTnI) 0-20ng/ml、肌钙蛋白T（cTnT）0-4μg/L、C-反应蛋白（CRP）0-50mg/L、B型钠尿肽（BNP）50-3000pg/ml、肌红蛋白（MYO）10-300ng/ml、N端-B型钠尿肽前体（NT-proBNP）50-3000pg/ml、同型半胱氨酸（HCY）0-30μmol/L、心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）0-30ng/ml、地高辛（Dig）0-4ng/ml，制得高、中、低三个浓度水平质控品溶液；

第四步，在第三步配制的高、中、低三个浓度质控品溶液中加入适量的防腐剂、蛋白保护剂和稳定剂后混合均匀；

第五步，对第四步得到的高、中、低三个浓度水平质控品进行调试测定，检测结果符合质量标准后，分装于玻璃瓶中，低温真空干燥呈冻干态后2~8℃保存。

所述第一步采用的正常人血清基质液可替换为正常人血浆/去激素人血清/去脂类人血清基质液，其中的HBsAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP血清学检测结果为阴性。

所述第四步中，所用的防腐剂为Proclin300、硫酸庆大霉素、NaN₃、Bronidox、1，2-苯并异噻唑啉-3-酮、甲基异噻唑啉酮中的一种或多种。

所述第四步中所用的蛋白保护剂为氨基比林、聚乙二醇、明胶或K30、L-赖氨酸盐酸盐的一种或多种。