[发明专利]一种治疗脑胶质瘤复合物的制备方法有效
| 申请号： | 201910186509.2 | 申请日： | 2019-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN109731106B | 公开（公告）日： | 2021-04-27 |
| 发明（设计）人： | 王莺;牛文博 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | A61K47/69 | 分类号： | A61K47/69;A61K31/704;A61K47/64;A61P35/00;B82Y5/00;B82Y30/00 |
| 代理公司： | 广州市天河庐阳专利事务所(普通合伙) 44244 | 代理人： | 胡济元;张祖华 |
| 地址： | 510515 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 治疗 胶质 复合物 制备 方法 | ||
1.一种治疗脑胶质瘤复合物的制备方法，该方法由以下步骤组成：
(1)取新鲜西柚去皮榨汁，梯度离心，取沉淀物，用PBS缓冲液重悬沉淀后以蔗糖为提取剂，采用密度梯度离心法提取外泌体，负80℃冻存，备用；
(2)按羧基化肝素︰肿瘤靶向环肽cRGD＝25︰3的质量比取羧基化肝素和肿瘤靶向环肽cRGD溶于二甲基亚砜中；然后以溶于二甲基亚砜中肿瘤靶向环肽cRGD的含量为基准，并按肿瘤靶向环肽cRGD︰1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺︰N-羟基琥珀酰亚胺＝1︰1︰2.5的摩尔比加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温反应12h后在去离子水中透析48h，冷冻干燥，得到Heparin-cRGD；其中所述的肿瘤靶向环肽cRGD为c(RGDyk)；
按己二酸二酰肼︰盐酸阿霉素＝3.33︰1的摩尔比称取己二酸二酰肼和盐酸阿霉素溶于甲醇，并用冰醋酸调节pH至4.5-5.5，室温避光反应12-16h后旋干得到ADH-DOX，然后加入去离子水重悬，并使得ADH-DOX在去离子水为4mg/mL，得到ADH-DOX重悬液；
取Heparin-cRGD和ADH-DOX重悬液混合，并使得Heparin-cRGD在ADH-DOX重悬液中的浓度为10mg/mL；按ADH-DOX︰1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺＝1︰2.5的摩尔比加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺，室温避光反应6-7h，用氢氧化钠溶液调pH至9.8，并在去离子水中透析48h，得到阿霉素纳米药物；
(3)按阿霉素纳米药物中盐酸阿霉素︰外泌体＝2︰1的质量比取制得的阿霉素纳米药物和外泌体，并先将外泌体复融后与阿霉素纳米药物混合，再以阿霉素纳米药物中盐酸阿霉素的含量为基准，并按盐酸阿霉素︰1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺︰N-羟基琥珀酰亚胺＝1︰1︰2.5的摩尔比加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，室温避光反应12-16h后100000g超速离心两次，每次1h；弃去上清后，冷冻干燥，即得所述的复合物。
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