[发明专利]一种虎奶菇的发酵培养方法以及从培养物中提取活性成分的方法

权利要求书

1.一种虎奶菇的发酵培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)制备液体培养基，所述液体培养基中含有土豆150～250g/L，葡萄糖15～25g/L，无水硫酸镁0.3～0.8g/L，磷酸二氢钾0.5～1.5g/L，琼脂5-6g/L，亚硒酸钠200～1000μg/L，余量为水；

(2)将所述液体培养基灭菌后，进行无菌接种，并在24～29℃，100～180r/min的转速下培养5～9天，得到发酵培养物；

(3)将所述发酵培养物抽滤后清洗，得到虎奶菇菌丝。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述液体培养基通过以下方法制备得到：

[1]将土豆切片后，加水煮沸4～7min，得到混合液；

[2]将所述混合液过滤后得到滤液，并向所述滤液中加入无水硫酸镁、磷酸二氢钾、亚硒酸钠、葡萄糖和琼脂，煮沸使其完全溶解，得到溶液；

[3]将所述溶液定容至1000mL，得到所述液体培养基。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述液体培养基的pH值为5～8，优选为7。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，灭菌在高压蒸汽灭菌锅中进行，条件为121℃下灭菌20min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，培养条件为在25℃，120r/min的转速下培养7天。

6.一种从虎奶菇发酵培养物中提取活性成分的方法，其特征在于，所述方法包括：向权利要求1至5中任一项方法培养得到的虎奶菇菌丝中加入有机溶剂浸泡，抽滤后得到滤液，所述滤液即为虎奶菇活性成分提取液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述有机溶剂选自石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、乙醚中的至少一种。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述浸泡时间为15～30h。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，将得到所述提取液蒸发浓缩后进行真空干燥，向得到膏状物中加入二甲基亚砜溶解，然后在硅胶柱中用氯仿与甲醇的混合溶剂体系进行梯度洗脱，得到洗脱液。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述氯仿与甲醇的体积比为1：(1～9)。